48T/96T 大鼠胃蛋白酶（Pepsin）elisa进口试剂盒

备试剂与收集血样：
1.  收集标本：血清、血浆（EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8 ℃ 保存48 小时；更长时间须冷冻（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反复冻融。
2.  标准品液配制：使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管，管加标本稀释液 900ul ，第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反复作对倍稀释，从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释（ 示例： 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。
4.  洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例：1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水）

规格：96T/48T
特点：灵敏性高、特异性强、重复性好
用途:科研实验等领域科学研究，不得用于临床诊断
运输:快递(根据客户要求，选择具体的运输方式)
试剂盒种属：羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
待检样本：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等

检测程序：
1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。
3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
样本实验前准备：
ELISA进口试剂盒液体样本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
（1）血清
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（2）血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（3）尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
（4）细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。
（5）培养细胞
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（6）组织标本
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

实验步骤:
石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度
1.烤片： 将待做切片置于切片架上，于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr；
2.脱蜡： 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min；
3.水化： 切片经下行酒精水化，无水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自来水冲洗，ddH2O 洗 2×2min；
4.抗原修复： 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复，常采用高压、微波（温度达到 98~100℃）或酶消化修复法，室温自然冷却，自来水冲洗，ddH2O 洗 2×2min，TBS 洗涤（2×2min）（具体修复方法见附 1）* 注：有些抗原勿需修复，直接进入第 5 步封闭。
5.封闭： 滴加试剂 B，37℃湿盒孵育 30 min；
6.加一抗：滴加用试剂 C（即用型一抗），37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜；
7.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min）；
8.封闭： 滴加试剂 B，37℃湿盒孵育 10 min；
9.加二抗： 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗（试剂 D），37℃湿盒中孵育30 min；
10.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min）；
11.封闭： 滴加试剂 Tween 20，37℃湿盒孵育封闭 20 min；
12.加 HRP-SA： 滴加用试剂 C 稀释的试剂 E（1：50~200，终浓度 5~20 nM），37℃湿盒中孵育 30 min；
13.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min），TBS 洗涤（2×5 min）；
14.显色：应用 DAB 溶液（试剂 F）显色；
15.复染：自来水充分冲洗，复染，脱水，透明；
16.封片： 待组织标本干后，用试剂缓冲甘油封固剂封片；
17.观察成像： 显微镜下观察成像。 
HPAC细胞，人胰腺腺泡上皮癌 人舌癌细胞,T6细胞 杂交瘤(B类);C3110D2E11梣酮（标准品）Fraxinellone质量规格：HPLC≥98%，标准品

JEG-3(人绒毛膜癌细胞) 5×106cells/瓶×2茶黄素(标准品)Theaflavin质量规格：HPLC≥98%，标准品

Promocell C-25010 Hepatocyte Growth Medium, 肝细胞生长培养基(即用型) 500ml茶黄素-3'-没食子酸酯Theaflavin-3'-gallate质量规格：HPLC≥95%，标准品

人间充质干细胞(骨髓)cDNAHMSC-bm cDNA茶黄素-3-没食子酸酯Theaflavin-3-gallate质量规格：HPLC≥95%，标准品

FAP Others Human 人 FAP / Seprase 人细胞裂解液 (阳性对照) 柴胡皂苷A(标准品)Saikosaponin A质量规格：HPLC≥98%，标准品
IL13RA2 Others Canine 狗 IL13RA2 / IL13R 人细胞裂解液 (阳性对照) Glycerokinase甘油激酶100克BR，5′d(NNN NNN NNN N)3′

CL-0141LLC-MK2(恒河猴肾细胞)5×106cells/瓶×23,5-二甲基-2-... 3,5-Dimethylpyrrole-2-carboxaldehyde,95% 2199-58-8 1G 通用试剂

B16-F1细胞，鼠色素瘤细胞系 血细胞瘤细胞系,Ramos细胞 仓鼠/小鼠杂交瘤细胞;145-2C11四拂硼醋 Fluoroboric ccid 1687-11-0

AR42J(大鼠胰腺外分泌细胞) 5×106cells/瓶×23-O-甲基-D-葡萄糖，英文名或英文缩写：3-O-metxylglucose，级别：BR，兔肝提取，规格：1克

CXADR Others Human 人 CXADR / CAR 人细胞裂解液 (阳性对照) 硅酮弹性体　IVNA
TE-10(人食管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 HCC1428(人癌细胞)L-天冬酸shēng huà shì jì容量：100克

CM-M052小鼠子宫平滑肌细胞*培养基100mL2-3-(4-本酰本酰)腺苷 5-三鳞醋三铵盐(-20°C) 2'- cND 3'-O-(4-BqNZOYLBqNZOYL)-cDqNOSINq 5'-TRIPHOSPHcTq TRIqTHYLcMMONIUM ScLT 11898-12-4

OLR1 Others Rat 大鼠 OLR1 / LOX1 人细胞裂解液 (阳性对照) 二钠shēng huà shì jì容量：RT500克

神经细胞培养基NM-prfwo7iumPHOSPHATE,DIBASIC,HEPTAHYDRATE嶙酸氢二钠,七水ACS级白色精细结晶粉末RTsigma

SiHa细胞，人细胞 小鼠血细胞,WEHI-3细胞 子宫成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)56-49-53-甲基胆 98%3-metxYLCHOLANTHRENE
大鼠胃蛋白酶(Pepsin)elisa进口试剂盒SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-7洛伐他汀(标准品)Lovastatin,Monacolin K质量规格：HPLC>98%,标准品

HFL-I细胞，胚肺成纤维细胞 人小肠癌细胞系,HIC细胞 CM-R061大鼠肾动脉平滑肌细胞*培养基100mL卢比前列腺素/卢比前列酮Lubiprostone质量规格：>99%

大鼠肝癌细胞;CBRH-7919 [CBRH7919]赖氨酸加压素；赖氨加压素Lypressin Acetate质量规格：>98%,BR

TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b / TEK 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸M肽Matrixyl Acetate质量规格：>95%脂溶性的

人心肌细胞-cDNAHCM-a cDNA盐酸甲氯芬酯Meclofenoxate HCl质量规格：≥98%,BR
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