细胞名称 人十二脂肠腺癌;HuTu-80说明书
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 每个细胞上蛙皮素受体的位点多达6000个。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS;1%NEAA
传代方法 1:2~1:5传代;2~3天换液1次。
传代情况 P143
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,13;D13S317:8,11;D16S539:10,11;D18S51:14,17;D19S433:13,15.2;D21S11:31,32.2;D2S1338:17,21;D3S1358:15,17;D5S818:12,13;D7S820:9,11;D8S1179:15;FGA:21,23;TH01:7;TPOX:9,11;vWA:16,18;
同工酶
染色体 40~47,XY
使用权限 A类
人十二脂肠腺癌;HuTu-80说明书操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
人十二脂肠腺癌;HuTu-80说明书注意事项:
1. 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
人十二脂肠腺癌;HuTu-80说明书美国菌种保藏中心, 又称美国模式菌种收集中心(ATCC),是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的,非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年,是世界上大的生物资源中心,由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理,是一家性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品,推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品:细胞株(3000多种);菌株(15000多种);动植物病毒株(2500多种)以及重组物质等。
人主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human free thyroxine (FT4) ELISA Kit 人游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒
Humanprostatespecificaigen,PSAELISAKit 人前列腺特异性抗原(PSA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanHepatitisGvirusIgG,HGV-IgGELISA试剂盒人庚型肝炎病毒IgM(HGV-IgM)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织冠状病毒3C类蛋白酶(SARS-CoV3C-likePROTEASE)活性荧光淬灭法定量检测试剂盒20次
Humanlymphotoxinβ,LTBELISAKit人淋巴毒素β(LTB)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠白介素17(IL-17)ELISA试剂盒 ,英文名: IL-17 ELISA Kit
Mice malondialdehyde (MDA) ELISA Kit 小鼠丙二(MDA)ELISA试剂盒
ELISA 小鼠胰岛素(mouse Insulin) 48T/96T 进口分装
CLIAKitforIL-2sRAlpha/CD25(Humansolubleierleukin-2receptor)ELISAkit人白介素2可溶性受体α链规格:48T/96T
通用型基因甲基化检测试剂盒20/50次
ELISAKitOxLDL大鼠氧化低密度脂蛋白规格:48T/96T
小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒 ,英文名: GM-CSF ELISA Kit
大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA检测试剂盒RatMacrophageMigrationInhibitoryFactor,MIFELISAKit 96T/48T
人低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP-5)免疫试剂盒 Human LRP-5 ELISA Kit
ratNoradrenaline,NAELISAKit大鼠去甲肾上腺素(NA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
F.solaniRFLP基因分析试剂盒20次
Mouserudimealbovineserumalbumincheck-upELISA试剂盒小鼠的牛血清白蛋白残留检测ELISA试剂盒规格:96T/48T
IL17RA Others Mouse 小鼠 IL17RA / IL17R / CD217 人细胞裂解液 (阳性对照)
HL-60, 人早幼粒白血病细胞
EB病毒转化的人B淋巴细胞(傣族);KM9405
GP2-293Luc细胞,人胚肾上皮包装细胞 绿猴恒河猴肾细胞,LLC-MK2细胞 CL-0348Hce-8693(人盲肠腺癌细胞(未分化))5×106cells/瓶×2
BC-021(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2
HREpC-c 人肾上皮细胞(HREpC) 500,000cells 人小神经胶质细胞HM
人肺癌细胞 1ml/T75
人肺癌细胞 1ml/T75
L1022 人肺癌细胞 1ml/T75
0225-12ScacLym 人小细胞肺癌肺转移细胞 1ml/T75
人十二脂肠腺癌;HuTu-80说明书正常大鼠肾细胞;NRK
人胚肾细胞-F克隆;293F
RET Others Human 人 RET Kinase (aa 658-1114) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
P3X63Ag8.653细胞,骨髓瘤细胞 耐长春新碱结肠癌细胞系,HCT-8/VCR细胞 CM-H028人淋巴血管内皮细胞*培养基100mL
口腔角质细胞培养基OKM-prf
REG3A Others Mouse 小鼠 REG3A 人细胞裂解液 (阳性对照)
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