人结肠癌细胞；RKO*

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细胞名称  人结肠癌细胞；RKO*
形态特性  上皮细胞 　
生长特性  　贴壁生长
特征特性   RKO是一个低分化的结肠癌细胞系。 RKO细胞含有野生型P53，但缺乏人甲状腺受体核受体(h-TR beta 1)。 RKO细胞的P53蛋白的水平高于RKO-E6细胞。 RKO细胞系是RKO-E6和RKO-AS45-1的亲本细胞系。 该细胞系在裸鼠中成瘤，且在软琼脂中形成集落。
培养条件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 优质胎牛血清，10%　
传代方法   消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况  PN5
冻存条件  *培养基+8%DMSO　
支原体检测  　阴性
STR   Amelogenin:X；CSF1PO:8,10；D13S317:8,11；D16S539:13；D18S51:11,12；D19S433:14；D21S11:27,30；D2S1338:16；D3S1358:16,19；D5S818:11,13；D7S820:8,10；D8S1179:9,13,14；FGA:20,21,22,23；TH01:6,10；TPOX:11；vWA:16,22
同工酶

染色体

使用权限 A类
人结肠癌细胞；RKO*操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
人结肠癌细胞；RKO*注意事项：
1. 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
人结肠癌细胞；RKO*美国菌种保藏中心， 又称美国模式菌种收集中心(ATCC)，是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的，非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年，是世界上大的生物资源中心，由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理，是一家性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品，推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品：细胞株（3000多种）；菌株（15000多种）；动植物病毒株（2500多种）以及重组物质等。
豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒 ，英文名： TGF-β1 ELISA Kit

Human protein kinase A (PKA) ELISA Kit 人蛋白激酶A(PKA)ELISA试剂盒

MonkeyMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAkit 猴子巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBMP-6(MouseBonemorphogeneticprotein6)ELISAKit小鼠骨形成蛋白6规格：48T/96T

细菌氢铋选择琼脂平板50个

rabbitNeuron-specificenolase,NSEELISAKit兔子神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠肌球蛋白重链1(MYH1)ELISA试剂盒 ，英文名： MYH1 ELISA Kit

人纤维连接素相关抗原(FRA)ELISA检测试剂盒Humanfibronectioelatedaigen,FRAELISAKit 96T/48T

大鼠细胞间粘附分子3(ICAM-3)免疫试剂盒 Rat iercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA Kit

英文名称Ratcardioophln-lELISAKit大鼠心肌营养素1(CT-1)规格：96T/48T

海石竹*培养基500毫升溶液/片剂

ELISAKitPAF人血小板活化因子规格：48T/96T
人腺苷酸环化酶1(AC-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

猪口蹄疫抗体免疫试剂盒 Pig Foot and Moh Disease Virus Aibody ELISA Kit

HumaumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISAKIT 人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanmitogenactivitedproteinkinase,MAPKELISA试剂盒人原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)ELISA试剂盒规格：96T/48T

组织乙脱氢酶总活性比色法定量检测试剂盒20次

HumanGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit人糖化血红蛋白A1c(A1c)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人肺成纤维细胞cDNAHPF cDNA

PTPN2 Others Mouse 小鼠 PTPN2 / TC-PTP (aa 2-314) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C4

T-47D细胞，管癌细胞 人食管癌细胞,EC871214细胞 大鼠骨肉瘤细胞;UMR-106

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B1

CDH2 Others Human 人 Cadherin-2 / CD325 / CDH2 / NCAD 人细胞裂解液 (阳性对照)
人肺成纤维细胞cDNAHPF cDNA

PTPN2 Others Mouse 小鼠 PTPN2 / TC-PTP (aa 2-314) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C4

T-47D细胞，管癌细胞 人食管癌细胞,EC871214细胞 大鼠骨肉瘤细胞;UMR-106

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B1

CDH2 Others Human 人 Cadherin-2 / CD325 / CDH2 / NCAD 人细胞裂解液 (阳性对照)
人结肠癌细胞；RKO*CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 人细胞裂解液 (阳性对照)

人淋巴细胞;1301

CM-H009人支气管上皮细胞*培养基100mL

SW480细胞，人结肠癌细胞 人黑色素瘤细胞,MV3细胞 EB病毒转化的人B淋巴细胞;Mao

HBL-100(人整合SV40基因的上皮细胞) 5×106cells/瓶×2

AZU1 Others Human 人 AZU1 / Azurocidin 1 / HBP 人细胞裂解液 (阳性对照)