产品介绍:
瑞氏染液主要应用于血液和骨髓涂片染色。 操作步骤 1. (选做)平置血涂片于染色架上,滴加甲醇固定液,室温固定15-30 分钟。 2. 吸去固定液,室温通风晾干。 3. 将试剂一滴加到载玻片上,均匀覆盖住载片上血细胞,染色时间约为1 分钟。等染液有变红的趋势时,迅速滴加两倍试剂一的量的试剂二。继续染色5 到8 分钟。 4. 小股水流洗片,防止将大量的细胞从载片上冲落下来从而影响以后的观察。30s 水洗结束后将载片放到阴凉处风干。 5. 显微镜镜检。 染色结果 1. 红细胞呈浅红色,中央稍淡而略有蝶形态。 2. 白细胞系统清晰易分,细胞膜清晰呈紫黑色,细胞核着色呈深浅不同的紫红色,胞浆中各种颗粒区分明显。其中中性粒细胞浆中颗粒呈淡紫红色,嗜酸粒细胞浆中颗粒呈桔红色、嗜碱性粒细胞胞浆中颗粒呈蓝褐色。单核细胞的胞浆呈灰蓝色,胞浆中颗粒呈细小淡紫红色或蓝紫色。淋巴细胞胞浆呈淡蓝色。 注意事项 1. 推片:取全血3 微升左右置载玻片上,将推玻片保持与载玻片30 度角,置于血滴正前方,稍往后移与血滴接触,即可见血液沿推片下缘散开,再匀速沿载玻片平面向前滑动,至血液铺完血膜为止。 2. 涂片时不要太厚也不要太薄,太厚红细胞重叠并易皱,太薄时不易找到白细胞。 3. 用蜡笔在血膜两头划线,平放于染色架上。血膜要干透后才能染色,否则染色时血膜易脱落。 4. 试剂一及二染液不能过少,以防很快蒸发引起染液沉淀。试剂一不可少于400 微升,试剂二是试剂一的1 倍量。滴加试剂一及二时要轻摇玻片或用洗耳球对准血片吹气,使染液充分混合。 5. 镜检时如果红细胞偏蓝,请放在蒸馏水中1-3 分钟,直至红润为止。 6. 染色过淡,可复染。染色过深,可用水冲洗或浸泡,还可用75%乙醇脱色3-5 秒。 储存:2~8℃,避光,有效期12个月。 |
中文名称:快速瑞氏染液
英文名称:
产品规格:250ml×3
货号:FS-X9791
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
培养操作步骤:
1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
肌侵蛋白(MTPN)英文名:MTPN 磷化β-连环蛋白/β-连环/β链接抗体包装5g
肌腱蛋白X(TNX)英文名:TNX 磷化β-连环蛋白/β-连环/β链接抗体包装5MG
肌肌激(CKM)英文名:CKM 磷化β-连环蛋白/β-连环/β链接抗体包装1g
肌红蛋白(MYO)英文名:MYO 磷化β-连环蛋白/β-连环/β链接抗体包装5g
肌三磷(ITPA)英文名:ITPA βA3/A1-crystallin蛋白抗体包装25g
肌钙蛋白T()英文名: γS-crystallin蛋白抗体包装100g
肌动蛋白相关蛋白2/3复合体亚基4(ARPC4)英文名:ARPC4 1号染色体开放阅读框85抗体包装25g
饥饿(GHRL)英文名:GHRL 1号染色体开放阅读框87抗体包装5g
回肠脂肪结合蛋白(FABP6)英文名:FABP6 1号染色体开放阅读框95抗体包装25g
黄体激(LH)英文名:LH 补体C1S链多肽抗体包装5g
脱氢(XDH)英文名:XDH 20号染色体开放阅读框106抗体包装50g
缓激肽(BK)英文名:BK 20号染色体开放阅读框107抗体包装100g
环氧化合物解4(EPHX4)英文名:EPHX4 20号染色体开放阅读框117抗体包装25g
环加氧2(PTGS2)英文名:PTGS2 20号染色体开放阅读框118抗体包装100g
环加氧1(PTGS1)英文名:PTGS1 20号染色体开放阅读框144抗体包装25g
曲霉Aspergillus│sp. 质量规格:HPLC>98%,标准品整合α2试剂盒乙酰紫草;Acetylshikonin
型副伤寒沙门菌Salmonella│paratyphi A 质量规格:>99.0%,USP34,BR,可用于培养整合A5试剂盒异丹叶大黄;Isorhapontige
花津浦芽孢杆菌Bacillus│hwajinpoensis 质量规格:>97%,USP34,BR真胰岛试剂盒7-乙基;7-Ethylcampt
快速瑞氏染液平菇—875 6-溴-4-羟基-3-喹啉羧乙酯组
异形盘孢 -2-苯乙酯组蛋白H3
苏云金芽孢杆 苯甲酯组蛋白H4
葡萄座腔 2-脱氧-2,2-二氟-D-赤式-五呋喃糖-3,5-二苯甲酯-1-甲磺酯组蛋白去乙酰化
新城疫病 磺间甲氧嘧啶组蛋白去乙酰化1
孢吸水链霉 2,5-吡二羧组蛋白去乙酰化3
巴氏醋杆 对乙酮组蛋白去乙酰化9
小豆交链孢霉 对羟基正辛酯组蛋白乙酰化
副猪嗜血杆 2'--4',5'-二氟苯乙酮组织蛋白B
栗疫 2-甲氧基-3-三氟组织蛋白K
运动节杆 5-溴-2-苯甲组织蛋白L
芍药枝孢霉 2-甲氧基-3-三氟甲基-5-溴吡啶组织蛋白S
酿酒酵母 3,5-二氟-4-吡啶甲组织蛋白X
树舌灵芝 硫化锂组织多肽抗原
变异链霉 亚乙基脲(2-咪唑酮)组织相容性复合体Ⅰ类相关基因A