特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
产品名称 | 分类 | 货号 |
菜豆荚斑驳病毒(BPMV)RNA核酸检测试剂盒 | 荧光探针法 | FS-P10758 |
PCR技术的定量原理:
扩增曲线
在Real-time qPCR中,对整个PCR反应扩增过程进行了实时的检测并记录其荧光信号,随着反应的进行,监测到的荧光信号可以绘制成一条曲线,即为扩增曲线。荧光扩增曲线一般分为基线期、指数增长期和平台期。
在Real-time qPCR扩增早期,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化,此时即为基线期。
PCR反应过程中产生的DNA拷贝数是呈指数形式增加的,随着反应循环数的增加,最终PCR反应不再以指数形式生成模板,从而进入“平台期”。在该时期,扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR的终产物量与起始模板量之间无线性关系,所以根据最终的PCR产物量不能计算出初始模板量。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
PCR检测试剂盒:
(一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中,按100g:3ml的比例加入Trizol试剂,严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg组织,宁多勿少)置于玻璃匀浆器中匀浆后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振荡15s,室温置5min。
(5)4ºC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol,振摇,置室温10min。
(8)4ºC 12000g离心10min,EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清,纸巾吸干,加入75%乙醇1ml,振摇,充分洗涤沉淀。
(10)4ºC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇,空气干燥10min(可离心加快干燥,尽量吸尽离心液体)。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混匀),-20ºC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度,所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳,显示出清晰的28s和18s两条rRNA。
血红红曲霉培养基: CM0085食品及食品增色用。提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no生长条件: 28-30℃ 真空冷冻干燥法
蜡状芽孢杆菌用于益生素研究。模式菌株: no鬼箭羽提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: CM0033生长条件: 37℃
KCTC23585模式菌株: yes安全等级: 1种属: Massilia│flavus土壤提供形式: 冻干物模式菌株培养基: 27
地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培养物安全等级: 1培养基: 2生长条件: 37℃
苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种70年代研究、开发、利用的优良菌株模式菌株: yes罹病虫体提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: 266生长条件: 28-30℃
-1568℃冰箱冻结;真空冷冻干燥
DSM41683=ATCC15484=IAM6A-704=IFO3934=JCMType strain;产生Produces 3-phosphoadenosine, 5-pho模式菌株: yes种属: Streptomyces│hygroscopicus提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: 0038生长条件: 28℃
产卟啉杆菌好氧不产氧光合异养细菌多样性研究模式菌株: no生物样/CCMP1740藻液提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: 511生长条件: 28℃
热脂环芽孢杆菌培养基: 437模式菌株: no土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1生长条件: 60℃ -80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法
明斯特沙门菌培养基: 2主要用于分类学研究提供形式: 冻干物安全等级: 3模式菌株: no生长条件: 37℃ 真空冷冻干燥法
12228,PCI1200检定庆大霉素效价模式菌株: no种属: Staphylococcus│epidermdis提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: CM0051生长条件: 37℃
伯克霍尔德氏菌微生物肥料模式菌株: no根际土壤提供形式: 斜面培养物安全等级: 1培养基: 141生长条件: 28
-1569℃冰箱冻结;真空冷冻干燥
乳乳球菌培养基: 33广泛应用于发酵乳、乳菌饮料、干酪、发酵豆乳、肉类、腌渍物、面包和饼干的加工。提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no生长条件: 37℃ -80℃冰箱冻结法
苏云金芽孢杆菌培养基: 2生物制剂的研制开发。提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no生长条件: 37℃ 液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法
曲霉培养基: 0014模式菌株: no土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1生长条件: 28℃ 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
草质素;蜀葵苷元;蜀葵甙元;3,4',5,7,8-五羟基黄酮phospho-Klf5/CKLF/Kruppel like factor 5, Human, mo, rat, horse, bovine, rabbit, pig, dog 磷化肠道内富含的Kruppel样因子5抗原TPST1 酪蛋白硫转移酶1抗体
菝葜皂苷元;知母皂苷元LDH(Lactate Dehydrogenase) 乳脱氢酶抗原TPSB2 肥大类胰蛋白酶β2
紫草苷Leptin receptor 瘦素受体TPP1/CLN2 生长抑制基因1蛋白抗体
格列风内酯PAFAH2/Lp-PLA2/PLA2G7(platelet-activating factor acetylhydrolase 2) 脂蛋白磷脂酶A2抗原TPO/Thrombopoietin 血小板生成素抗体(巨核集落刺激因子)
梣酮Lgr5/GPR49 肠上皮干蛋白(多肽)TPO 甲状腺过氧化物酶抗体
白鲜碱LH(Luteinizing Hormone) 促黄体生成素抗原TPH2 5色氨羟化酶2抗体
紫菀酮LH(Luteinizing Hormone) 人促黄体生成素(多肽)TPH/Trptophan Hydroxylase 色氨羟化酶抗体
二氢欧山芹当归酯LH/CG Receptor(Luteinizing Hormone/Choriogonadotropin Receptor) 人促黄体生成素受体抗原TPD54/TPD52L2 肿瘤蛋白D54蛋白抗体
白头翁皂苷B4L-HDC (L-Histidine decarboxylase) L-组氨脱羧酶抗原TPD52L1/D53 肿瘤蛋白D53抗体
石吊兰甲素LIF peptide 白血病抑制因子抗原TPD52/Prostate and colon associated protein 前列腺癌和结肠癌相关蛋白
菜豆荚斑驳病毒(BPMV)RNA核酸检测试剂盒Rosuvastatin 瑞舒伐他汀/罗苏伐他汀游离 质量规格:>98%,BR
SudanI/SolventYellow14 苏丹I/溶剂黄14 质量规格:>98%,BR
SudanII/SolventOrange7 苏丹II/苏丹2/溶剂橙7 质量规格:>98%,BR
SudanBlueII/SolventBlue35 苏丹蓝II/溶剂蓝35 质量规格:>98%,BR
Methylred 甲基红 质量规格:>98%,BR
m-Methylred 间甲基红 质量规格:>98%,BR
MethylRedsodiumsalt 甲基红钠盐/性红2 质量规格:>98%,BR
Cinoxacin 西诺沙星;新恶 质量规格:>98%,BR