ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。在实验过程中请严格按照使用说明操作,必能得出准确的实验结果,可提供免费技术咨询服务!
产品名称 | LIF人白血病抑制因子ELISA试剂盒实验原理 |
英文名称 | Human Leukemia inhibitory factor, LIF Elisa Kit |
货号 | FS-H64294 |
公司“质量是企业是生命之源”,选购优势如下:
1*抗体——、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的优化方案——回收利用率高、可靠性强
4适用于体液、组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5公司产品仅用于科研可检测指标齐全:生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人裂解液 (阳性对照)
人心肌裂解物HCML
XRCC5 & XRCC6 Others Human 人 XRCC5 & XRCC6 Heterodimer 杆状病-昆虫裂解液 (阳性对照)
NIH:OVCAR-3,卵巢癌 人食管癌,KYSR450 豚鼠皮肤;GP-S2
tTA基因修饰的鼠畸胎瘤(B类);F9-CAG-tTA-3A1
鼠癌;CCC-Ca761-03
FABPB 脑型脂肪结合蛋白抗体规格: 0.2ml
factor V 凝血因子5抗体规格: 0.2ml
factor VIII(FVIII) human 第八因子相关抗原抗体规格: 0.1ml
factor VIII(FVIII) 第八因子相关抗原抗体规格: 0.1ml
factor XIII 凝血因子13抗体规格: 0.2ml
Leupeptin分子式:C20H38N6O4分子量:426.55
Levistilide A分子式:C24H28O4分子量:380
LGlutamic acid 1tertButyl ester hydrochloride分子式:C9H18CLNO4分子量:239.7
LGlutamic acid 1tertButyl ester hydrochloride分子式:C9H18CLNO4分子量:239.7
LGlutamic acid 1tertButyl ester hydrochloride分子式:C9H18CLNO4分子量:239.7
LGlutamic acid 5cyclohexyl ester分子式:C11H19NO4分子量:229.27
LGlutamic acid 5cyclohexyl ester分子式:C11H19NO4分子量:229.27
LGlutamic acid 5methyl ester分子式:C6H11NO4分子量:161.16
LGlutamic acid 5methyl ester分子式:C6H11NO4分子量:161.16
Lglutamic acid pnitroanilide分子式:C11H13N3O5分子量:267.24
Lglutamic acid pnitroanilide分子式:C11H13N3O5分子量:267.24
LGlutamine分子式:C5H10N2O3分子量:146.14
LGlutamine分子式:C5H10N2O3分子量:146.14
LGlutamine分子式:C5H10N2O3分子量:146.14
LHistidine分子式:C6H9N3O2分子量:155.15
LHistidine分子式:C6H9N3O2分子量:155.15
LHistidine分子式:C6H9N3O2分子量:155.15
LHistidine分子式:C6H9N3O2分子量:155.15
LHistidine分子式:C6H9N3O2分子量:155.15
LHistidine分子式:C6H9N3O2分子量:155.15
脂联素(ADP)酶联免疫试剂盒 ,英文名: ADP ELISA Kit
脂酰肌抗体IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA检测试剂盒humanphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit 96T/48T
丙氨氨基转移酶(ALT)酶联免疫试剂盒 Rat Alanine aminoansferase,ALT ELISA Kit
CLIAKitfoIMP-3(Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase3)ELISAKit基质金属蛋白酶抑制因子3规格:48T/96T
全组织免疫组织化学HRP酶联DAB*间接检测试剂盒(含一抗和HRP二抗)10次
ELISAKitASCA抗酿酒酵母抗体规格:48T/96T
犬双氢睾(DHT)酶联免疫试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
山羊肝脂酶(HL)酶联免疫试剂盒 Goat hepatic lipase,HL ELISA Kit
脑钠素(BNP)酶联免疫试剂盒 ,英文名: BNP ELISA Kit
Rat5-Hydroxyyptamine,5HT酶联免疫试剂盒5羟色(5-HT)酶联免疫试剂盒规格:96T/48T
Humancalcitoningenerelatedpeptide,CGRP酶联免疫试剂盒降钙素基因相关肽(CGRP)酶联免疫试剂盒规格:96T/48T
HumancytokeratinHighMolecularWeight,CK-HMWELISAKit高分子量角蛋白(CK-HMW)酶联免疫试剂盒规格:96T/48T
LIF人白血病抑制因子ELISA试剂盒实验原理6号染色体开放阅读框204抗体2-溴-4'-苯乙Porcine RAG-1 (Recombination Activating Gene 1) ELISA Kit
6号染色体开放阅读框206抗体4--α-甲基苄胺Porcine MCP/CD46 (Membrane Cofactor Protein) ELISA Kit
6号染色体开放阅读框211抗体对苯甲酰Porcine GLP-1 (Glucagon Like Peptide 1) ELISA Kit
6号染色体开放阅读框225抗体对苯甲酰Porcine NRG-3 (Neuregulin 3) ELISA Kit
6号染色体开放阅读框25抗体对苯甲酰Porcine TP53 (Tumor Protein p53) ELISA Kit
6号染色体开放阅读框35抗体3-苯甲Porcine NPY (Neuropeptide Y) ELISA Kit
6号染色体开放阅读框52抗体3-苯甲Porcine TPP1 (Tripeptidyl Peptidase I) ELISA Kit
6号染色体开放阅读框57抗体3-苯甲Porcine ATF-5 (Activating Tranion Factor 5) ELISA Kit
操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准