产品名称 | 货号 | AXB9883 | |
规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 | 英文名 | SUP-b15：SUPb15 |
分类 | 人细胞系 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
商品介绍：
别称 | Sup-B15 |
年龄（性别） | 8岁 |
组织来源 | 骨髓；急性淋巴母细胞白血病；B淋巴母细胞 |
细胞形态 | 悬浮细胞 |
细胞形态 | 淋巴细胞样 |
详情介绍 | SUP-B15细胞来源于一位B细胞全部为费城染色体阳性的8岁小孩的骨髓。SUP-B15细胞表达多个B细胞标记，但不表达T细胞标记。β-2微球蛋白、Leu12、My7(CD13)、OKT9(CD71)、OKT10(CD38)及CALLA(CD10)抗体阳性。CB1、Leu1(CD5)、Leu2(CD8)、Leu3(CD4)、Leu4(CD3)、Leu5(CD2)、Leu6(CD1a)、Leu9、LeuM1(CD15)、My9(CD33)、表面抗原(sIg-)及Epstein-Barr病毒阴性。 |
生物安全等级 | 1 |
生长培养基 | IMDM＋0.05mM β-mercaptoethanol＋20% FBS＋1% P/S |
推荐传代比例 | 1:2-1:4 |
推荐换液频率 | 2~3次/周 |
倍增时间 | ~20-60 hours |
冻存条件 | |
冻存液 | 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO |
温度 | 液氮 |
培养条件 | |
气相 | 空气，95%；CO2，5% |
温度 | 37℃ |
抗原表达情况 | CD1a -; CD2 -; CD3 -; CD4 -; CD5 -; CD8 -; CD10+; CD13+; CD38+; CD71+; HLA DR+ |
公司所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗，仅可用于工业或科研等非医疗目的。
细胞冻存注意事项：
(1) 细胞的收获
用来冻存的细胞一般选择在细胞约铺满 90% 的时候，这时细胞生长状态好，细胞数量也多，并且在收获细胞前 24 小时换一次培养液。收获用来冻存的细胞开始时方法和平时一样，用 100xg 离心 5 分钟收集细胞再重悬，活细胞记数。稀释或浓缩到细胞保存的最终细胞浓度的二倍(一般是 400-1000 万 细胞 /ml )，加入已经配好的等体积的培养液保护剂混合溶液中轻轻混匀，分装到冻存管，冷冻保存。
(2) 保护剂的使用
细胞冻存中， 一般使用DMSO 作为保护剂。在细胞冻存中， DMSO 使用的最终浓度一般是 5-15% ，某种具体细胞的冻存液中的DMSO浓度可以从ATCC查到。对特别敏感的细胞特别是杂交瘤细胞在冻存时使用 95% 血清和 5%DMSO 可能会好些。保护剂在使用时先用培养液或血清配成最终浓度的2倍，再与等体积的悬浮细胞的培养液混合。
(3) 细胞冻存的速率
细胞的冷冻速率最适控制在让细胞有足够的时间脱水而又不被过度脱水导致细胞损害。对大多数细胞来说，每分钟降 1 至 3 ℃是合适的。通常的操作是把细胞先在-20℃1-2个小时，再放入 -80℃冰箱过夜(如果没有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再转入液氮罐或低于 -130℃的冰箱长期保存。
(4) 储存环境
细胞长期保存温度是 -130 ℃或更低。液氮罐中气态层温度在 -140℃至 -180℃之间，细胞可保存在气态层或浸入液氮中，如果可能最好保存在气态层，因为这样可避免由于有液氮进入冻存管而在拿出细胞时引起爆炸(但是这样液氮罐内只能存储少量液氮，需要经常添加)。细胞也可以在-80℃冰箱保存几个月左右的时间。
公司正在出售的产品：
跨膜蛋白48 英文名；NDC1APC标记小鼠CD22单克隆抗体 英文名；mouse CD22/APC
跨膜蛋白49抗体 英文名；TMEM49APC标记小鼠CD23单克隆抗体 英文名；mouse CD23/APC
跨膜蛋白4超家族成员3抗体 英文名；TM4SF3APC标记小鼠CD24单克隆抗体 英文名；mouse CD24/APC
跨膜蛋白59抗体 英文名；TMEM59APC标记小鼠CD25单克隆抗体 英文名；Mouse CD25(IL2RA)/APC
跨膜蛋白59样蛋白抗体 英文名；TMEM59LAPC标记小鼠CD274单克隆抗体 英文名；mouse CD274/APC
跨膜蛋白62抗体 英文名；TMEM62APC标记小鼠CD31单克隆抗体 英文名；mouse CD31/APC
跨膜蛋白66抗体 英文名；TMEM66APC标记小鼠CD38单克隆抗体 英文名；mouse CD38/APC
跨膜蛋白67抗体 英文名；TMEM67/MeckelinAPC标记小鼠CD3e单克隆抗体 英文名；Mouse CD3e/APC
人Ph+急淋白血病细胞系;SUP-b15跨膜蛋白6超家族成员1抗体 英文名；TM6SF1APC标记小鼠CD40单克隆抗体 英文名；mouse CD40/APC
跨膜蛋白70抗体 英文名；TMEM70APC标记小鼠CD44单克隆抗体 英文名；mouse CD44/APC
跨膜蛋白74抗体 英文名；TMEM74APC标记小鼠CD45.1单克隆抗体 英文名；mouse CD45.1/APC
跨膜蛋白76/TMEM76抗体 英文名；HGSNATAPC标记小鼠CD45.2单克隆抗体 英文名；mouse CD45.2/APC
跨膜蛋白85抗体 英文名；TMEM85APC标记小鼠CD45R单克隆抗体 英文名；mouse CD45R/APC
跨膜蛋白87A抗体 英文名；TMEM87AAPC标记小鼠CD45单克隆抗体 英文名；mouse CD45/APC
操作步骤:
(1) 细胞系培养：取6cm细胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105个细胞培养液，37℃ CO2培养密度至40%~60%，密度过大，转染后不利筛选细胞。
(2) 转染液制备：在EP管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量)
A液：用不含血清培养基稀释1ug 质粒DNA。
B液：用不含血清培养基稀释2ul脂质体。
分别将A液与B液轻弹混匀，静置5分钟。
(3) 吸取B液加入至A液中，轻弹混匀。室温中置10-15分钟。
(4) 转染准备：用1mL不含血清培养液漂洗两次，再加入4mL不含血清培养液。
(5) 转染：把A/B复合物缓缓加入培养液中，摇匀，37℃温箱置6~24小时，吸除无血清转染液，换入正常培养液继续培养。
(6) 瞬时转染后，可在48h-72h细胞长满之后，提取细胞蛋白或者RNA，验证敲减/过表达效率。
