PCR的反应条件：
因扩增片段的大小、反应体积、使用扩增仪器的不同而不同。
◇ 循环次数
根据模板DNA的量以及扩增片段的大小，设定25～30个循环。
如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，则会出现Smear。
◇ Anneal以及Extension
合适的Anneal温度通常在45～68℃之间 (预备实验可2℃间隔进行)。另外，由于在60～68℃间，也有很高的活性, 因此可在此温度范围内设定Anneal-Extension温度, 进行2 Step PCR。Anneal-Extension温度为68℃ 时，每kbp大体可设定30秒～1分钟；当温度设定在68℃以下时, 时间设定可稍长一些。通常，Anneal温度太高，有时会得不到扩增产物；Anneal温度太低时，容易发生非特异性反应。另外，Extension时间太短时，会得不到扩增产物或者会有一些短的非特异性产物优成；而Extension时间太长时，会出现Smear。
参数规格：
产品名称：沙门氏菌SPP-spec核酸检测试剂盒
产品规格：50T
产品货号：FS-P10418
产品分类：荧光PCR法
产品运输：低温运输
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
定量PCR方法：
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗di高辛或生物素酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，最终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。
实时荧光定量PCR：
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的：
1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确，重现性*定量方法，已得到的*，广泛用于基因表达研究、转基因研究，药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。
干酪乳杆菌用于分类学研究以及发酵乳制品模式菌株: no发酵牛乳提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: 6生长条件: 37℃
金黄色葡萄球菌生长条件: 37℃培养基: 598提供形式: 冻干物安全等级: 2模式菌株: no 真空冷冻干燥法
嘴突凸脐蠕孢生长条件: 25℃培养基: 0014提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no
叶氏假交替单胞菌微生物/耐冷菌模式菌株: no水样/海水提供形式: 斜面培养物安全等级: 1培养基: 471生长条件: 20℃
-537℃冰箱冻结；真空冷冻干燥
甲型副伤寒沙门菌研究模式菌株: no血提供形式: 其他安全等级: 2培养基: CM0051生长条件: 37℃
舟形毛壳培养基: CM0014模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培养物安全等级: 1生长条件: 26C -80℃冰箱冻结；真空冷冻干燥
JCM13563模式菌株: yes安全等级: 1种属: Haloterrigena│limicola卤水及底泥提供形式: 冻干物模式菌株培养基: 0212
蚜虫拟酵母生长条件: 17-20℃培养基: 0013提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
海底嗜冷杆菌病原菌研究模式菌株: no生物样/仿刺参提供形式: 斜面培养物安全等级: 2培养基: 471生长条件: 28℃
小单孢菌属菌种双功能酶抑制剂模式菌株: no土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: CM0027生长条件: 28C
-538℃冰箱冻结；真空冷冻干燥
沙门氏菌用于食品微生物学教学。模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培养物安全等级: 1培养基: 32生长条件: 37℃
细黄链霉菌生长条件: 28℃培养基: 0012提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
盐单胞菌培养基: 745抗重金属，用于抗砷机制的研究；可用于生物修复。沉积物/深海沉积物提供形式: 冻干物模式菌株: no生长条件: 18-28℃ 液氮超低温冻结法；-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法
橄榄色盾壳霉培养基: 14模式菌株: no枣树提供形式: 斜面培养物安全等级: 1生长条件: 25 定期移植法
硫柳钠wo7ium thiomersalAR25g
A5006-100GL-Arginine L-精安74-79-3100g66
A0414-1GAmphotericin B 两性霉素 B1397-89-31G
Western二抗稀释液100ml
NBT1g
录代正丙烷Chloro-propane色标5ml
ER0492HincII (HindII)2500 units16
C9754-100MGColchicine 秋水仙碱 (秋水仙素)64-86-8100mg
D-Fructose500g
DL-精安DL-argininepR5g
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)ELISA试剂盒 ，英文名： IGFBP-6 ELISA Kit
人抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA检测试剂盒HumanAi-glucoprotein210,GP210ELISAKit 96T/48T
大鼠β防御素2(DEFB2)免疫试剂盒 Rat beta-defensin 2,DEFB2 ELISA kit
CLIAKitforSynucleinmouseELISAkit小鼠突触素规格：48T/96T
人体N-乙酰转移酶1(NAT1)活性比色法定量检测试剂盒20次
ELISAKitAMA人抗单核抗体规格：48T/96T
沙门氏菌SPP-spec核酸检测试剂盒20(R)原人参三醇1453-93-6英文名：20(R)Protopanaxatriol
英文别名：(20R)-5α-Dammar-24-ene-3β,6α,12β,20-tetrol;(20R)-Dammar-24-ene-3β,6α,12β,20-tetrol;(20R)-Protopanaxatriol
登录号：1453-93-6
分子式：C30H52O4
分子量：476.73
分子结构：
外观：白色粉末
规格：20 mg/支
纯度：≥ 98%
用途：用于含量测定/鉴定/药理实验等。
提取来源：五加科植物人参Panax ginseng C. A. Mey.的干燥根
溶解性：可溶于、、DMSO等溶剂。
熔点：261-263℃
药理药效：大补元气，滋补强壮，安神益智，生津，复脉固脱等功效。
贮存条件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
