Hoechst 33342/PI双染试剂盒正在热销的产品：GLP-2 胰高血糖样肽-2抗体无水硫钙 ≥99.99% metals basis
GLP-2 胰高血糖样肽-2抗体铝 CP
GLUT1 葡萄糖转运蛋白1抗体硬酯铝 CP
GLUT2 葡萄糖转运蛋白2抗体硫氢 AR
GLUT3 葡萄糖转运蛋白3抗体溴水 ACS, 99.5%
GLUT4 葡萄糖转运蛋白4抗体苄溴化 98%
Gly
培养操作步骤：
1．公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
英文名称：Apoptotic Cell Hoechst 33342/PI Detection Kit
产品规格：100T
货号：FS-X9827
产品介绍:
荧光染料Hoechst33342 能少许进入正常细胞膜，使其染上低蓝色，而凋亡细胞的膜通透性增强，因此进入凋亡细胞中的Hoechst33342 比正常细胞的多，荧光强度要比正常细胞中要高，此外，凋亡细胞的染色体DNA 的结构发生了改变从而使该染料能更有效地与DNA 结合，并且凋亡细胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到损伤不能有效地将Hoechst33342 排出到细胞外使之在细胞内积累增加等都使凋亡细胞的蓝色荧光增强。而PI 染料是不能进入细胞膜完整的正常细胞和凋亡细胞中，即活细胞对PI 染料拒染，而坏死细胞由于膜完整性在早期即已破损，可被PI 染料染色。 用Hoechst33342 结合PI 染料对凋亡细胞进行双染色，就可在流式细胞仪上将正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞区别开来。在双变量流式细胞仪的散点图上，这三群细胞表现分别为：正常细胞为低蓝色/低红色（Hoechst33342+/PI+），凋亡细胞为高蓝色/低红色（Hoechst33342++/PI+），坏死细胞为低蓝色/高红色（Hoechst33342+/PI++） 储存：2-8℃，避光，有效期一年。 |
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
Ⅱ型前胶原基端原肽(PⅡNT)英文名：PⅡNT 磷化热休克蛋白β5/α晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体包装50mg
Ⅱ型胶原交联羧基端肽(CTXⅡ)英文名：CTXⅡ 1号染色体开放阅读框167抗体包装1g
Ⅱ型胶原(COL2)英文名：COL2 1号染色体开放阅读框168抗体包装250mg
ⅡD组磷脂A2(PLA2G2D)英文名：PLA2G2D 1号染色体开放阅读框170抗体包装250mg
ⅡA组磷脂A2(PLA2G2A)英文名：PLA2G2A 1号染色体开放阅读框172抗体包装1g
Ⅰ型前胶原羧基端原肽(PⅠCP)英文名：PⅠCP 1号染色体开放阅读框173抗体包装5g
Ⅰ型前胶原基端原肽(PⅠNP)英文名：PⅠNP 1号染色体开放阅读框174抗体包装25g
Ⅰ型前胶原(PCⅠ)英文名：PCⅠ 1号染色体开放阅读框177抗体包装5g
Ⅰ型胶原交联羧基端肽(CTXⅠ)英文名：CTXⅠ 1号染色体开放阅读框180抗体包装1g
Ⅰ型胶原交联基端肽(NTXⅠ)英文名：NTXⅠ 1号染色体开放阅读框182抗体包装1g
Ⅰ型胶原α2(COL1α2)英文名：COL1α2 1号染色体开放阅读框183抗体包装25g
Ⅰ型胶原α1(COL1α1)英文名：COL1α1 1号染色体开放阅读框187抗体包装5g
Ⅰ型胶原(COL1)英文名：COL1 1号染色体开放阅读框189抗体包装5g
90kDa热休克蛋白β1(HSP90β1)英文名：HSP90β1 1号染色体开放阅读框190抗体包装100ml
90kDa热休克蛋白αA1(HSP90αA1)英文名：HSP90αA1 1号染色体开放阅读框192抗体包装25ml
轮枝菌Verticillium│sp. 质量规格：HPLC>98%,标准品乙肝表面抗原大蛋白试剂盒原花青B2;Procyanidin B
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 质量规格：>98%,BR乙脱氢试剂盒原花青B1;Procyanidin B
链霉菌属菌种Streptomyces│sp. 质量规格：HPLC>98%,标准品乙呋试剂盒乙酰紫堇灵;Acetylcorynoli
Hoechst 33342/PI双染试剂盒 叔丁基二硫抗mannobioside糖抗体
亮白曲霉 2,2-二氟-3-羟基戊乙酯锌-α2脂蛋白
乌克兰毛霉 2-溴-3,4-二氟苯岩藻糖基化触珠蛋白
短柄帚霉 6-甲基-3H-噻吩[2,3-d]嘧啶-4-酮胆固-25-羟化
鼠李糖乳杆 磺酚S受体自身抗体
产气肠杆* 3,5-二溴-2-吡受体
新疆盐单胞 5-溴-4-甲基-1H-吲唑S转移Mu1
禾谷镰孢 2--3-氟-5-硝基吡啶乙酰CoA羧化
总状共头霉 噻吩并[3,2-b]吡啶-7-蛋白激M2
大孢联轭霉 5-溴吲唑-3-甲系统性红斑狼疮IgG
黑曲霉 2-乙硫基-5-硝基吡啶系统性红斑狼疮IgA
围小丛壳 L-肌肽锌系统性红斑狼疮IgM
蜡样芽胞杆 4-苯氧基苄糖化血红蛋白
博斯氏属 2-叔丁苯纤维蛋白单体
叶球形微杆 4,6-二-2-甲氧基嘧啶酮激M2
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
