培养操作步骤:
1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
中文名称:丽春红酸性品红染色液
英文名称:
产品规格:100ml
货号:FS-X9957
产品介绍:
用途: 丽春红酸性品红染色液是Masson三色染色的有效成分之一,主要用于肌纤维的染色,染色后呈红色 储存条件:室温,避光,12个月 |
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
壳菌卷曲螺旋结构域蛋白43抗体Human EIF4A3 兔血栓A2(TXA2)免疫试剂盒
热带假丝酵母卷曲螺旋结构域蛋白46抗体Human EIF4B 兔血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)免疫试剂盒
枇杷假尾孢褐斑病卷曲螺旋结构域蛋白63抗体Human EIF4E3 兔血红氧合1(HMOX1)免疫试剂盒
香菇卷曲螺旋结构域蛋白54抗体Human EIF4E2 兔血管性血友病因子/瑞斯托霉辅因子(VWF)免疫试剂盒
毛簇木霉卷曲螺旋结构域蛋白61抗体Human EIF4EBP2 兔血管生成2(ANG-2)免疫试剂盒
解淀粉芽孢杆菌植物亚种卷曲螺旋结构域蛋白8抗体Human EIF4G1 兔血管内皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)免疫试剂盒
禽腺病神经酰激CERK抗体Human EIF4G3 兔血管内皮生长因子(VEGF)免疫试剂盒
假交替单胞菌分裂周期样激2抗体Human EIF3E 兔血管紧张Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫试剂盒
猪瘟病分裂周期样激3抗体Human EIF4H 兔信号肽,CUB域,EGF样1(SCUBE1)免疫试剂盒
拟青霉17号染色体开放阅读框49抗体Human EIF3G 兔心肌特异性肌钙蛋白T(c)免疫试剂盒
苏云金芽胞杆菌肯尼亚亚种17号染色体开放阅读框53抗体Human EIF3H 兔心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫试剂盒
四川散斑壳17号染色体开放阅读框57抗体Human EIF3J 兔纤溶抑制因子(TAFI)免疫试剂盒
柱状田头菇17号染色体开放阅读框64抗体Human EIF3I 兔纤溶抗纤溶复合物(PAP)免疫试剂盒
耐冷冷杆菌17号染色体开放阅读框66抗体Human EIF3L 兔色b-245重链(CYBB)免疫试剂盒
栗疫菌17号染色体开放阅读框74抗体Human EIF3K 兔维甲受体应答蛋白2(RARRES2)免疫试剂盒
梨叶壳小圆孢菌17号染色体开放阅读框75抗体Human EIF2C1 兔糖化血红蛋白A1c(A1c)免疫试剂盒
百慕大公海橄榄菌Pelagibaca│bermudensis 质量规格:>98%,BRSH2携带蛋白试剂盒马鞭草
葡萄座腔菌Botryosphaeria│dothidea (Moug.) Ces. & De Not. 质量规格:>99.0%,BRSeryl- tRNA合成,质试剂盒牡荆油
大西洋假丝酵母Candida│atlantica 质量规格:>98%,BRSalusin Beta试剂盒马兜铃C
丽春红酸性品红染色液梅花状青霉 3--4-氨基DPPX-IgG抗体
黄硬皮马勃 3-硝基-1,2,4-三唑IgLON家族蛋白5抗体
阿维链霉 双乙酰乙酰对苯二猪肉绦虫
枯草芽孢杆 2-叔丁基-5-抗神经节脂抗体
绛红产色小单胞 L-缬苄酯盐盐抗神经节脂抗体
红冬孢酵母属 甘苄酯盐盐抗神经节脂抗体
白灵侧耳 3-(1-萘氧基)-1,2-环氧烷抗神经节脂抗体
Hyalodendriella betulae Crous 4-吡啶-2-甲甲酯抗神经节脂抗体
贪噬 十二烷基甲酯抗神经节脂抗体
香菇 6-氨基-1-甲基离子通道辅助蛋白1
不吸水链霉 4-乙氧基-2,3-二氟-6-胞内离子通道蛋白1
孟氏假单胞 正丁基缩水甘油磷
枯草芽孢杆 N-甲基二烯基组蛋白脱乙酰基5
相思根瘤 2,3-二溴-6-吡啶甲氧基肾上腺
植物乳杆 4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂烷-2-基)-1H-吲唑可溶性髓系触发受体-2
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)