产品名称 | 人非小细胞肺癌细胞+RFP；A549+RFP | 货号 | AXB10157 |
规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 | 英文名 | RFPA549+RFP |
分类 | 人细胞系 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
公司所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗，仅可用于工业或科研等非医疗目的。
细胞冻存注意事项：
(1) 细胞的收获
用来冻存的细胞一般选择在细胞约铺满 90% 的时候，这时细胞生长状态好，细胞数量也多，并且在收获细胞前 24 小时换一次培养液。收获用来冻存的细胞开始时方法和平时一样，用 100xg 离心 5 分钟收集细胞再重悬，活细胞记数。稀释或浓缩到细胞保存的最终细胞浓度的二倍(一般是 400-1000 万 细胞 /ml )，加入已经配好的等体积的培养液保护剂混合溶液中轻轻混匀，分装到冻存管，冷冻保存。
(2) 保护剂的使用
细胞冻存中， 一般使用DMSO 作为保护剂。在细胞冻存中， DMSO 使用的最终浓度一般是 5-15% ，某种具体细胞的冻存液中的DMSO浓度可以从ATCC查到。对特别敏感的细胞特别是杂交瘤细胞在冻存时使用 95% 血清和 5%DMSO 可能会好些。保护剂在使用时先用培养液或血清配成最终浓度的2倍，再与等体积的悬浮细胞的培养液混合。
(3) 细胞冻存的速率
细胞的冷冻速率最适控制在让细胞有足够的时间脱水而又不被过度脱水导致细胞损害。对大多数细胞来说，每分钟降 1 至 3 ℃是合适的。通常的操作是把细胞先在-20℃1-2个小时，再放入 -80℃冰箱过夜(如果没有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再转入液氮罐或低于 -130℃的冰箱长期保存。
(4) 储存环境
细胞长期保存温度是 -130 ℃或更低。液氮罐中气态层温度在 -140℃至 -180℃之间，细胞可保存在气态层或浸入液氮中，如果可能最好保存在气态层，因为这样可避免由于有液氮进入冻存管而在拿出细胞时引起爆炸(但是这样液氮罐内只能存储少量液氮，需要经常添加)。细胞也可以在-80℃冰箱保存几个月左右的时间。
公司正在出售的产品：
大鼠盐皮质激素受体(MR)ELISA试剂盒 ，英文名： MR ELISA Kit
Mouse thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 小鼠抗复合物(TAT)ELISA试剂盒
MouseEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGFELISAKit 小鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanComplemefragme䣐咀䣐
小鼠无翅型MMTV整合位点家族成员3A(W3A)ELISA试剂盒 ，英文名： W3A ELISA Kit
兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA检测试剂盒Rabbitpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit 96T/48T
牛腺病毒3(ADV3)抗体(IgG)免疫试剂盒 Bovine Adenovirus 3(ADV3)aibody IgG ELISA kit
英文名称humanAbELISAKIT人抗促甲状腺素受体抗体(Ab)ELISAKIT规格：96T/4䣐咀䣐
小鼠Ⅳ型胶原α1(COL4α1)ELISA试剂盒 ，英文名： COL4α1 ELISA Kit
人特异性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA检测试剂盒HumanPregnancySpecificβ1Glycoprotein,SP1/PSβ1-GELISAKit 96T/48T
大鼠肥胖抑制素免疫试剂盒 Rat Obestatin ELISA Kit
CLIAKitforUP(HumanProteinuria)ELISAKit人尿蛋白规格：48T/96T
尿比色法定量检测试剂盒50次
ELISAKi䣐咀䣐
人非小细胞肺癌细胞+RFP；A549+RFP小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA 试剂盒
Human mucosal addressin cell adhesion molecule (MAdCAM-1) ELISA Kit 人黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA试剂盒
HumancytokeratinLowMolecularWeight,CK-LMWELISAKit 人低分子量细胞角蛋白(CK-LMW)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Guineapigierleukin4,IL-4ELISA试剂盒豚鼠白介素4(䣐咀䣐
操作步骤:
(1) 细胞系培养：取6cm细胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105个细胞培养液，37℃ CO2培养密度至40%~60%，密度过大，转染后不利筛选细胞。
(2) 转染液制备：在EP管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量)
A液：用不含血清培养基稀释1ug 质粒DNA。
B液：用不含血清培养基稀释2ul脂质体。
分别将A液与B液轻弹混匀，静置5分钟。
(3) 吸取B液加入至A液中，轻弹混匀。室温中置10-15分钟。
(4) 转染准备：用1mL不含血清培养液漂洗两次，再加入4mL不含血清培养液。
(5) 转染：把A/B复合物缓缓加入培养液中，摇匀，37℃温箱置6~24小时，吸除无血清转染液，换入正常培养液继续培养。
(6) 瞬时转染后，可在48h-72h细胞长满之后，提取细胞蛋白或者RNA，验证敲减/过表达效率。
