48T/96T 大鼠泛素连接酶（E3/UBPL）elisa试剂盒

选择ELISA试剂盒应从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。
产品名称：大鼠泛素连接酶(E3/UBPL)elisa试剂盒
英文名称：Rat E3/ubiquitin-protein ligase,E3/UBPL ELISA Kit
规格：48T/96T
保存： 2-8℃（频繁使用时）；-20℃（长时间不用时）。
有效期： 6 个月(4℃)；12 个月（-20℃）。
用途： 用于体外定量分析人血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液
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具有如下优点：
一、高效、灵敏、特异的抗体；
二、稳定的重复性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；
五、性价比非常好，节省实验经费。
试剂配制：
1、酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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注意事项：
1加样：
①实验样本过多时，可分批次操作，以减少实验时间延长造成的误差；
②加酶试剂后，用吸水纸吸干孔外试剂；
③作定量试验时，使用加样器加注试剂，并经常校正其准确性，此外，要做到一份样本一个移液头，防止交叉污染。
2.温育：
①如有两种温度，尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件；
②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察；
③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”，因此尽量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板时，拍板时要垂直，避免交叉污染，用力不能过猛，防止抗原抗体复合物脱离；
②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅，若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出；
③为了洗涤效果好，实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法，在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次，或适当增加洗板的次数；
4.显色：
ELISA试剂盒中，如以四甲基联苯胺(TMB)为底物，则提供的底物为A和B两瓶应用液；如以邻苯二胺(OPD)为底物，则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂，要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光，但A、B液应尽量避免接触金属器械。
5.判定：
读取结果要在15-30 min内完成，定性测定用肉眼判读试验结果时，反应板应水平距离白色背景10-15 cm；定量测定时用酶标仪读取结果，酶标仪不应置于阳光或强光照射下，需先预热15-30 min再进行测试。
瘦素(LEP)(酶联免疫吸附试验法)　98%　微紫青霉　1g

瘦素(LEP)(酶联免疫吸附试验法)　98%　苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种　25g

L选择素(SELL)(酶联免疫吸附试验法)　98%　玉蕈、真姬菇　5g

单核细胞趋化蛋白2(MCP2)(酶联免疫吸附试验法)　98%　里氏木霉　1g

单核细胞趋化蛋白2(MCP2)(酶联免疫吸附试验法)　98%　黄伞(10号)　1g

单核细胞趋化蛋白2(MCP2)(酶联免疫吸附试验法)　98%　短波单胞菌属　250mg

单核细胞趋化蛋白2(MCP2)(酶联免疫吸附试验法)　98%　枯草芽孢杆菌　25g

巨噬细胞来源趋化因子(MDC)(酶联免疫吸附试验法)　98%　酿酒酵母　5g

抗平滑肌抗体(ASMA)(酶联免疫吸附试验法)　>95.0%(GC)　紫带拟迷孔菌　100g

组织蛋白酶K(CTSK)(酶联免疫吸附试验法)　97%　黑曲霉　1g

组织蛋白酶K(CTSK)(酶联免疫吸附试验法)　98%　球孢白僵菌　1g

组织蛋白酶K(CTSK)(酶联免疫吸附试验法)　98%　青枯假单胞菌　5g

组织蛋白酶K(CTSK)(酶联免疫吸附试验法)　97%　解脂亚罗酵母　25g

组织蛋白酶K(CTSK)(酶联免疫吸附试验法)　97%　酿酒酵母　5g

组织蛋白酶K(CTSK)(酶联免疫吸附试验法)　98%　地中海中间根瘤菌　25g

胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP6)(酶联免疫吸附试验法)　98%　霍氏肠杆菌　5g

胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP6)(酶联免疫吸附试验法)　1M THF溶液　嗜盐动性球菌　25ml

胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP6)(酶联免疫吸附试验法)　98%　大肠埃希氏杆菌　1g
大鼠泛素连接酶(E3/UBPL)elisa试剂盒COLLAGEN I蛋白表达定量　CVB-IgM(Coxsackievirus B-Immunoglobulin M) 　300 ul

细胞COLLAGEN II蛋白表达流式细胞仪　CVB-IgG(Coxsackievirus B-Immunoglobulin G) 　100 ul

载玻片细胞COLLAGEN II蛋白表达荧光显微镜　ECHO-IgG(Enteric CytopathicOrphan virus-Immunoglobulin G) 　20 ul

冰冻切片组织COLLAGEN II蛋白表达荧光显微镜　ECHO-IgM(Enteric CytopathicOrphan virus-Immunoglobulin M) 　100 ul

石蜡切片组织COLLAGEN II蛋白表达荧光显微镜　HDV-IgM(Hepatitis D Virus-Immunoglobulin M) 　100 ul

载玻片细胞βCOLLAGEN II蛋白表达NBT显色光学显微镜　TOX-IgM(Toxoplasma-Immunoglobulin M) 　20 ul

冰冻切片组织COLLAGEN II蛋白表达NBT显色光学显微镜　TOX-IgG(Toxoplasma-Immunoglobulin G) 　100µl

石蜡切片组织COLLAGEN II蛋白表达NBT显色光学显微镜　EV71-IgG(Enterovirus 71-Immunoglobulin G) 　100 ul

细胞COLLAGEN II蛋白表达比色法定量　AS-IgG(anti sperm-Immunoglobulin G) 　100 ul

细胞COLLAGEN II蛋白表达荧光定量　EM-IgG(Endometrium-Immunoglobulin G) 　100 ul

COLLAGEN II蛋白表达西方杂交分析　A16-IgM(Coxsackie virus A16-Immunoglobulin M) 　100 ul

COLLAGEN II蛋白免疫共沉淀分析　EV71-IgM(Enterovirus 71-Immunoglobulin M) 　100 ul

COLLAGEN II蛋白表达定量　HCG-IgG(chorionic gonadotropin-Immunoglobulin G) 　100 ul

脘蛋白基因变异分析　HP-IgG(Helicobcter Pylori-Immunoglobulin G) 　20 ul

活体细胞脘蛋白去糖基化　EM-IgG(Endometrium-Immunoglobulin G) 　100 ul

体外脘蛋白去糖基化　HCG-IgG(chorionic gonadotropin-Immunoglobulin G) 　100 ul
操作流程如下：
（1）仅用于科研待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。