试剂配制
① 缓冲液：将缓冲液试剂袋中的试剂倒出，溶于500ml 蒸馏水中，溶解、混匀即可。
② 底物：按需添加的底物量，向标有“底物”的试剂瓶中加入蒸馏水溶解、混匀即可。0~5oC环境下冷藏保存。
底物添加量为20ul时，应往标注为底物的瓶中加入2.7ml蒸馏水；
底物添加量为100ul时，应往标注为底物的瓶中加入13ml蒸馏水。
③ 显色剂：无需配制放入冰箱冷藏（0~5℃），切勿冷冻结冰。
④ 酶试剂：酶试剂已配成溶液可直接使用。平常要在0~5oC环境条件下冷藏保存，切勿冷冻至结冰！！！
操作步骤
1.样品前处理：
(1 (1) ①植株：称取2g样品（叶菜剪成宽度为1厘米的菜样，块根菜取1厘米左右的表皮样品）放入三角瓶中，加入10ml缓冲液后，振荡提取2分钟；
②茶叶：称取0.5g茶叶样品，加入5ml丙酮，振荡提取5分钟；取0.2ml上述丙酮溶液，40~50℃水浴蒸干；加入2.5ml缓冲液，振荡2分钟；（自备丙酮）
(2) 若浸提液清澈无色或颜色较浅，取上清液待测；
若浸提液混浊，离心，取上清液待测；
若浸提液色素干扰严重，可用活性炭脱色，具体方法如下：
将浸提液转移至另一个三角瓶中，加入0.1~0.5g活性碳(根据颜色深浅调整)，水浴70℃加热5分钟，取出趁热过滤，滤液待测。
[备注]：葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，可采取整株（体）浸提，避免次生物物质干扰。
2.检测样品的制备：
(1) 空白对照液:
①取酶100ul，缓冲液2.5ml，加入反应瓶中，混匀静置10分钟后，再加入显色剂100ul。
②加入底物20ul（或100ul）；
③摇匀后立即测试。
(2) 检测样品液:
①取酶100ul，待测样品液2.5ml，加入反应瓶中，混匀静置10分钟后，再加入显色剂100ul。
②加入底物20ul（或100ul）；
③摇匀后立即测试。
3 检测样品测试：
(1) 空白对照测量：
① 取2.5ml对照样品于比色皿中；
② 将比色皿放入的通道中；
③ 按“对照”键，屏幕下方显示测量时间；
④ 检测结束后，仪器自动显示对照样品的测试结果△Ao。
[备注]：a 当空白对照值在0.15-0.3之间时，可继续做实验；
b 当空白对照值在＜0.15时，需重做空白对照，若重复多次的空白对照值＜0.15时，必须更换酶试剂。
c 当空白对照值在＞0.3时,要调试减少仪器的测量时间，重新做空白对照。
(2) 样品测量：
① 取2.5ml待测样品于比色皿中；
② 将比色皿放入的通道中；
③ 按“样品”键，屏幕下方显示测量时间；
④ 检测结束后，仪器自动显示通道检测样品的测试结果△Ai。
判断标准
(1) 样品的抑制率在40~50%之间为可疑农残超标样品；
(2) 抑制率＞50%为农残超标样品，表明被测样品的农药残留毒性可能超过安全的界定标准，建议用气相色谱等仪器分析法作进一步确认。
注意事项
① 加入底物后，应迅速混匀，立即测试。
② 测试前根据需添加底物的量对底物进行稀释：
③ 所用的检测液对皮肤均具有不同程度的伤害，使用时请做好防护。不慎沾到皮肤应立即擦干并用大量水冲洗。
检测试剂请务必在2~4℃冰箱保存。
