HEK293​细胞-人胚胎肾细胞​

HEK293细胞-人胚胎肾细胞

    早期报道中指出该细胞基因组中含有腺病毒5（Ad5）基因组的左侧端和右侧端的DNA，但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现，Ad5的1～4344位线性核苷酸整合入细胞染色体19q13.2。HEK293细胞-人胚胎肾细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主。可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体，由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。生物安全级别为2级。

细胞名称：人胚肾细胞

细胞简称：HEK-293

产品货号：TCH-C190

种属来源：人

组织来源：胚肾

疾病特征：/

细胞形态：上皮细胞样

生长特性：贴壁生长

培养体系：DMEM-H+10%FBS+1%P/S

配套培养基货号：TCH-G190

传代比例：1:4-1:8，每2-3天换液一次

传代周期：24-48 h

培养条件：气相：95%空气+5%CO2，温度：37℃

冻存条件：60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO，液氮储存

质量检测：细菌、真菌、支原体检测均为阴性

参考文献：

"Xie QW, et al. Complementation analysis of mutants of nitric oxide synthase reveals that the active site requires two hemes. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 4891-4896, 1996. PubMed: 8643499

Da Costa LT, et al. Converting cancer genes into killer genes. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 4192-4196, 1996. PubMed: 8633039

Graham FL, et al. Characteristics of a human cell line transformed by DNA from human adenovirus type 5. J. Gen. Virol. 36: 59-72, 1977. PubMed: 886304

Graham FL, et al. Defective transforming capacity of adenovirus type 5 host-range mutants. Virology 86: 10-21, 1978. PubMed: 664220

Harrison T, et al. Host-range mutants of adenovirus type 5 defective for growth in HeLa cells. Virology 77: 319-329, 1977. PubMed: 841862

Bodary SC, McLean JW. The integrin beta 1 subunit associates with the vitronectin receptor alpha v subunit to form a novel vitronectin receptor in a human embryonic kidney cell line. J. Biol. Chem. 265: 5938-5941, 1990. PubMed: 1690718

Goodrum FD, Ornelles DA. The early region 1B 55-kilodalton oncoprotein of adenovirus relieves growth restrictions imposed on viral replication by the cell cycle. J. Virol. 71: 548-561, 1997. PubMed: 8985383"

HEK293细胞-人胚胎肾细胞使用说明书

收到细胞后请务必仔细阅读产品资料，了解细胞相关信息，如贴壁特性 (贴壁/悬浮/半贴壁半悬浮)、细胞形态、培养体系、传代比例和换液频率等。

| T25培养瓶常温运送

1. 收到细胞后，请先检查培养瓶是否完好，培养基是否外渗、浑浊，并核对瓶身上的标签信息、细胞数量是否与发货清单一致。如有异常情况，及时与我们联系。

    注：培养瓶内飘浮的小体积絮状物可能是脱落的细胞，对于这种情况，建议在细胞培养箱静置2 h 后再观察，如仍有细胞未贴壁，可收集培养上清离心后再接种到原瓶或新的培养容器中。

2. 用75%酒精消毒细胞培养瓶表面，不要打开培养瓶，将细胞平放于细胞培养箱内静置1~2 h，待细胞恢复基本生长状态后，再进行后续操作。

3. 显微镜下观察细胞状态，观察细胞时请拍摄清晰的100×、200×照片各2~3张留存。

4. 细胞种类不同，细胞的运输液不同。请根据培养瓶上的标识判断培养瓶内培养基是否可以继续使用。

5. 若细胞密度低于80%，请及时更换为预热的培养基培养。若细胞密度大于80%，可进行传代。具体见《细胞培养操作说明》。

| 冻存管干冰运送

1. 收到细胞后，请先检查包装是否完整，干冰是否充足，冻存管有无破损等情况，并核对冻存管上的标签信息、细胞管数是否与发货清单一致。如有异常情况，及时与我们联系。

2. 低温保存的细胞非常脆弱，细胞收到后如在24 h内复苏，可存放于-80℃冰箱；超过24 h请存放于液氮中。建议尽快复苏，具体复苏操作见《细胞培养操作说明》。

3. 复苏细胞后，换液之前需在显微镜下观察细胞状态，观察细胞时请拍摄清晰的100×、200×照片各2~3张留存。

4. 部分细胞贴壁时间较长，请根据说明书进行操作。若复苏有异常，及时与我们联系。

5. 后续根据细胞汇合度继续培养或消化传代。

|  血清管常温运送

1. 在收到细胞后，请先检查试剂管是否完好，培养基是否外渗，并核对试剂管上的标签信息、细胞管数是否与发货清单一致。如有异常情况，及时与我们联系。

2. 收到细胞后请尽快进行处理，如不能及时处理，请将细胞放至常温环境，通常15~25℃为佳，并尽量在24 h内处理。血清管细胞悬液可能会呈现一定程度的浑浊，属于正常现象，可放心操作。

3. 用75%酒精消毒血清管表面，在洁净工作台内小心开盖，尽量避免气泡溢出，轻柔吹打数次，转移至15 mL离心管中。

4. 吸取1 mL预热的培养基清洗血清管内壁，同样转移至15 mL离心管，并吹打均匀。

5. 250 g离心4 min。离心后去除上清，加入适量预热的培养基重悬后接种至合适大小的培养容器中，放置于培养箱内进行培养。

6. 换液前需在显微镜下观察细胞状态，观察细胞时请拍摄清晰的100×、200×照片各2~3张留存。

7. 后续根据汇合度继续培养或消化传代。具体见《细胞培养操作说明》。

| 细胞胶囊技术

1. “细胞胶囊”包括细胞管和溶解Buffer共2个试剂管。收到细胞后，请先检查试剂管是否完好，培养基是否外渗，并核对管身上的标签信息、细胞数量是否与发货清单一致。如有异常情况，及时与我们联系。

2. 收到“细胞胶囊”后需尽快处理, 如不能及时处理, 请将细胞放至常温环境, 通常15~25℃为佳，并尽量在24 h内处理。“细胞胶囊”管内的液体肉眼观察可能会呈现一定程度的浑浊，这属于正常现象，可放心操作。

3. 用75%酒精消毒试剂管表面，在洁净工作台内小心的打开细胞胶囊管盖，尽量避免气泡溢出。 

4. 小心弃去细胞胶囊管中的全部液体。

5. 将溶解Buffer全部加入到细胞胶囊管中，拧紧管盖，上下颠倒3~5 min。观察到球状的细胞胶囊溶解后，小心开盖，使用移液枪轻柔吹打数次，将所有液体转移到15 mL离心管内。

7. 250 g离心4 min。离心后去上清，加入适量预热培养基重悬后，将细胞悬液接种到合适大小的培养容器中（T25瓶或6cm皿），放置于细胞培养箱中培养。

8. 换液前需在显微镜下观察细胞状态，观察细胞时请拍摄清晰的100×、200×照片各2~3张留存。如有异常情况，及时与我们联系。

9. 后续根据细胞汇合度继续培养或消化传代。具体见《细胞培养操作说明》。