原代兔乳腺成纤维细胞
英文名称 | Rabbit Mammary Fibroblast Cells | 组织来源 | 乳腺组织 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁 | 货号 | GOY-01X0782 |
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液 0.25%yi蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
兔乳腺成纤维分离自乳腺组织；乳腺位于皮下浅筋膜的浅层与深层之间，浅筋膜伸向乳腺组织内形成条索状的小叶间隔，一端连于胸肌筋膜，另一端连于皮肤，将乳腺腺体固定在胸部的皮下组织之中。乳腺是哺乳动物少数可以重复经历生长、功能分化和退化过程的器官之一。纤维结缔组织伸入乳腺组织之间，形成许多间隔，这些纤维结缔组织对乳房起固定作用，而纤维结缔组织是由成纤维细胞构成的。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的乳腺成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁wan全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。 |
方法简介：
公司实验室分离的兔乳腺成纤维采用yi蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的兔乳腺成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1. 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶（或皿）中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
2. 消化培养法
组织消化法是把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和 非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状 变成 絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠 瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
3. 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
4. 器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
1. 取材的组织要尽快培养。如若不能及时培养，可将组织浸泡于培养液内，放置于冰浴或4℃冰箱中，如果组织块很大，应切成1cm3以下的小块再低温保存，但时间不能超过24h。
2. 从消化道、周围有坏死组织等污染因素存在的区域取材，可用含500～1000u/ml的青BSS液漂洗5～10min，或用10%注射液冲洗浸泡10min再作培养。
3. 组织块不易贴壁，可预先在瓶壁涂薄层血清、胎汁或鼠尾胶原等。
4. 原代培养的1～2d内要特别注意观察是否有细菌、真菌、霉菌的污染，一旦发现，要及时清除。
小鼠肾腺癌细胞 RAG（种属鉴定） | 小鼠肾癌细胞带荧光Renca+LUC（种属鉴定） |
云南宣威肺腺癌细胞系绿色荧光标记XWLC-05+GFP | 田鼠布鲁氏菌探针法荧光定量PCR试剂盒 |
人卵巢癌耐药株SKOV3/DDP(STR鉴定正确) | 犬布鲁氏杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 |
人类星形胶质瘤耐细胞U251MG/TMZ (STR鉴定正确) | 流产布鲁氏菌探针法荧光定量PCR试剂盒 |
小鼠淋巴瘤细胞EL-4-B51（种属鉴定） | 牛布鲁氏杆菌（流产布鲁氏菌）探针法荧光定量PCR试剂盒 |
人肝细胞HL-7702[L-02](STR鉴定正确) | 布鲁氏杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 |
负鼠肾细胞OK（种属鉴定） | 山羊疱疹病毒2型探针法荧光定量PCR试剂盒 |
小鼠视网膜小胶质细胞 | 山羊疱疹病毒1型探针法荧光定量PCR试剂盒 |
小鼠网织细胞肉瘤M5076（种属鉴定） | 木鼠布鲁氏菌探针法荧光定量PCR试剂盒 |
人非小细胞肺癌细胞 NCI-H647(STR鉴定正确) | 绵羊布鲁氏菌探针法荧光定量PCR试剂盒 |
小鼠胚胎瘤细胞ATDC5（种属鉴定） | 猪布鲁氏杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 |
人宫颈癌细胞C33A(STR鉴定正确) | 球孢白僵菌探针法荧光定量PCR试剂盒 |
大鼠正常肝细胞BRL3A（种属鉴定） | 原代兔乳腺成纤维细胞埃可病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 |
小鼠主动脉血管平滑肌细胞MOVAS（种属鉴定） | 比氏肠微孢虫探针法荧光定量PCR试剂盒 |
阿留申水貂病毒（AMDV）检测试剂盒（荧光PCR法） | 鸡异刺线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 |
