1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
产品名称 | 大鼠原代主动脉内皮细胞专用培养基 | 货号 | GOY-XP3165 |
规格 | 100mL/500mL | 用途 | 仅供科研研究实验 |
产品介绍
由团队精心优化，经过长期测试，本产品可保持大鼠原代主动脉内皮细胞最佳的生长状态。
本产品中已包含大鼠原代主动脉内皮细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于大鼠原代主动脉内皮细胞的培养。
运输：放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输
保存方法：按照对应保存条件保存12个月，配置好的培养基2℃～8℃,保存2个月；
质量控制
正常人表皮角质形成细胞 | 人原代黑色素瘤细胞专用培养基 |
人血管瘤内皮细胞 | 大鼠原代海绵体内皮细胞专用培养基 |
猪肺泡巨噬细胞 | 小鼠原代食管上皮细胞专用培养基 |
小鼠原代牙龈成纤维细胞专用培养基 | 小鼠原代椎体终板软骨干细胞专用培养基 |
人包皮成纤维细胞 | 大鼠原代子宫成纤维细胞专用培养基 |
大鼠肌母细胞 | 牛原代小肠黏膜上皮细胞专用培养基 |
牛子宫内膜上皮细胞 | 猪原代主动脉内皮细胞专用培养基 |
人肾小管上皮细胞 | 猪原代睾丸支持细胞专用培养基 |
小鼠前B淋巴母细胞瘤细胞 | 大鼠原代胃黏膜上皮细胞专用培养基 |
KATO III人胃癌细胞 | 大鼠原代神经干细胞专用培养基 |
Walker氏癌肉瘤256瘤株 | 大鼠原代主动脉内皮细胞专用培养基人原代卵巢成纤维细胞专用培养基 |
大鼠脂肪间充质干细胞 | 人原代胃平滑肌细胞专用培养基 |
大鼠心肌微血管内皮细胞 | 兔原代小肠平滑肌细胞专用培养基 |
鸡动脉内皮细胞 | 小鼠原代颈动脉成纤维细胞专用培养基 |
大鼠背根神经细胞 | 小鼠血管内皮瘤细胞 |
细胞复苏：
从液氮罐中取出冻存细胞，迅速放入37℃水浴中解冻。
解冻后，将细胞转移到含有新鲜培养基的培养皿中，轻轻摇动使细胞均匀分布。
放入37℃、5%CO2的培养箱中培养。
细胞换液：
吸除或倒掉培养皿内的旧培养液。
加入PBS缓冲液，轻轻漂洗细胞，以去除悬浮在细胞表面的碎片，重复几次。
加入新的培养基。
细胞传代：
当细胞长到80%~90%时，进行传代。
吸除或倒掉瓶内旧培养液，加入PBS缓冲液漂洗。
加入消化液，轻轻摇动使消化液流遍所有细胞表面。
将培养瓶放入37℃培养箱中静止几分钟，观察细胞变化。当细胞间隙增大后，加入含有血清的培养液终止消化。
吹打细胞使其成为悬液，转移到离心管中离心。
弃上清，加入适量的细胞培养液重悬细胞。
按比例分装到新的培养皿中，补加新鲜培养基。
做好标记，放入37℃、5%CO2的培养箱中培养。
细胞冻存：
选择对数生长期的细胞进行冻存。
将细胞转移到离心管中离心，弃上清。
加入适量的冻存液（如90%的培养基+10%的DMSO），轻轻吹打重悬细胞。
将细胞转移到冷冻保存管中，标记后放入程序降温盒，再放入-80℃冰箱冻存。几小时后或过夜转至液氮罐保存。
