科研冻存细胞收集处理过程

科研冻存细胞收集处理过程：

1、收到快递后，若发现冻存管破损、箱内已无干冰，请拍照后及时联系供货商。

2、收到细胞后请尽快复苏，给冻存管（外观×1张）拍照留存，隔天在倒置显微镜下确认细胞状态，给细胞（100倍×2张，200倍×2张）拍照，售后时需提供。

3、复苏细胞时不可直接将冻存管丢进水浴锅，用镊子夹住冻存管顶部，将冻存管下部浸入水中即可，由于水浴锅处于实验室暴露、高温、湿润环境，极易滋生各种微生物，建议在水浴锅中加入Deeming水浴锅安全卫士抑制各类微生物的滋生，大程度上防止水浴锅中的微生物对冻存细胞造成的污染。

4、在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作，冻存管、试剂、耗材拿进去之前一定要用75%酒精消毒，培养试剂尽量不要共用，若有共用试剂，建议配成完培后整体过滤除菌。

5、原代细胞传代建议T25培养瓶1:2传代 ，保种1支，另外1支传代至T25新瓶，前面代次建议代代保种，以妨出现问题后无种可用，原代细胞需根据生长状况判断传代比例。

6、第一次传代时需要摸索消化时间，建议每隔30s就观察一次，并记录消化时间，细胞会随着后期传代次数的增多而延长消化时间。

7、由于细胞在运输过程中失去原有适宜的生长条件且长时间颠簸，收到细胞进行复苏后，前1-2代培养可适当提高血清含量以促进恢复细胞原有状态并缩短到达对数期的时间。

8、原代细胞建议选用厂家供应的专用培养基，否则可能会因为改变培养条件，大大缩短细胞的培养代数，造成种子细胞的浪费。

9、及时更换和补充培养箱水盘内的水，建议加入Deeming细胞培养箱水盘安全卫士进行污染物的预防。

10、 购买的细胞只可用于科研，不得应用于人体。