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elisa检测试剂盒实验步骤的误差

时间:2018-9-14阅读:281
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elisa检测试剂盒实验步骤的误差
1.抗原或抗体能吸附于固相载体表面,并保持其免疫学活性;
2.抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;
3.酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,可根据已知浓度的抗原或抗体的颜色反应的深浅绘制标准曲线并依此计算出未知样品中抗体或抗原的浓度。
一般来说,elisa试剂盒厂家的elisa试剂盒操作技术员会在一切准备就绪后开始实验,而在实验过程当时却常会出现一些问题。由于ELISA实验操作步骤复杂,可能一个小小的误差就会出现大问题,那么我们要如何解决并完善实验步骤的误差问题呢?今天elisa试剂盒厂家带给您的资讯主题是:宝贝们抓紧看!小技巧改变elisa试剂盒实验误差大问题。
①:由于滴瓶的精密性肯定不如加样器,不排除不同滴头滴量的误差。另外滴加过程中是否产生气泡、速度是否均匀,是否颤动等影响液量的因素均可导致以上情况。高标准要求时应使用加样器。
②:阈值附近实际上是个灰区,不能截然分为阴性、阳性,国外elisa试剂盒厂家均要求对这部分可疑标本进行奇数次复检,以次数多者为准,如一次阳两次后判为阴,但实际上是否为阴不好说,只有判为可疑,临床上可以让患者过一段时间后再测。
③:肉眼观察稍显色,酶标仪打印为阴性的标本在实际工作中是难以避免的,肉眼目测结果不可靠,应以酶标仪判读为准。
④:不同的elisa试剂盒厂家产品其生产工艺和操作方法会略有不同,务必按照所用试剂盒严格操作,否则容易产生检测结果的不确定性.
⑤:加样时样品量误差,对于阴或很阳的标本影响不大,但对阈值附近的标本影响极大,建议校对加样器。
⑥:反应时间的误差,做大量标本时,一些特殊标本可能影响较大。
⑦:由阴性变为强阳性原因多为操作过程中漏加试剂等有关。

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