人胸肾表达趋化因子（BRAKCXCL14）ELISA试剂盒洗涤方式

         人胸肾表达趋化因子(BRAK/CXCL14)ELISA试剂盒洗涤方式及注意事项

 人胸肾表达趋化因子(BRAK/CXCL14)ELISA试剂盒国产进口现货中的洗涤

洗涤是ELISA实验中是多次数的操作，也是非常重要的步骤。不严格的洗涤容易出现洗不干净或交叉污染现象，实验重复效果差的现象。不管用多道加样器、洗瓶、吸管，还是洗板机，严格按照说明书操作不要减少步骤洗涤的洗涤体积、洗涤时间和洗涤次数。注意标准化操作将减少实验误差和不同实验之间的误差。操作者常出现洗板不干净现象，请比照操作：

a)洗液不要溢出孔外，以免污染相邻的孔，特别是每次洗板的前两遍，若高浓度的孔污染了低浓度的孔或空白孔，其造成的交叉污染的孔是洗不掉的，背景肯定会增高。

b)特别注意：设计实验的时候要考虑实验孔的位置，保证甩掉洗液时，空白孔、低浓度孔或阴性对照组在上面或一侧或分开。同时注意甩掉洗液的动作翻转(从正上方旋转120-150度)要迅速、干脆。甩板不要手腕左右摇摆、旋转来甩液体!甩出后以直线方式补2-3次甩出液体。

c)用干净的滤纸，不要用卫生纸，因为细小粉尘或者碎屑容易吸附到孔底，导致洗板不干净，结果偏高或偏低，重复孔的数值也会相差很大。

d)每次拍板不要重复在一个地方拍，特别是洗去酶的步骤;拍板不宜过轻，否则拍不干净，拍板很用力不会对蛋白有什么影响。但注意不要太重，以至把板条给拍断。每次洗板后轻叩几下，后一次一定要扣干净。

e)不能减少洗液体积、洗板时间和次数。洗板时间太短，洗板效果不佳。延长洗板时间和增加洗板次数可以使背景更干净。

检测范围和保存条件及有效期

1.试剂盒保存：2-8℃

2.有效期：6个月

计算

以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

人胸肾表达趋化因子(BRAK/CXCL14)ELISA试剂盒国产进口现货操作注意事项：

1)试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。

3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4)使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6)洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7)底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8)实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

9)不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

10)加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

11)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

检测范围：1ng/L -30ng/L