鸡肺动脉内皮细胞-上海邦景实业有限公司

货号	BJ-X97004

细胞培养步骤:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

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产品名称	鸡肺动脉内皮细胞
规格	5×10⁵Cells/T25培养瓶
货号	BJ-X97004

商品属性：

名称 鸡肺动脉内皮细胞

2.组织来源：肺动脉组织

3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

鸡肺大动脉内皮细胞分离自肺大动脉组织；肺大动脉亦称肺动脉干。在呼吸空气的脊椎动物中，把静脉血由心脏导向肺脏的动脉。肺大动脉起于右心室，在主动脉之前向左上后方斜行。细胞呈单层多角形铺路石状分布；该细胞在维持血管内外的动态平衡、合成和分泌细胞因子和介质、维持凝血和纤溶的动态平衡中起重要作用。肺大动脉内皮细胞呈单层多角形铺路石状分布，该细胞在维持血管内外的动态平衡、合成和分泌细胞因子和介质、维持凝血和纤溶的动态平衡中起重要作用。

5.方法简介：

()实验室分离的鸡肺大动脉内皮细胞采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测：

()实验室分离的鸡肺动脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：

包被条件PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

产品货号CM-C003

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态内皮细胞样

传代特性可传2-3代

消化液0.25%

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%

图片13.jpg

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

重组人 CXCL12 / SDF1b 蛋白 (Fc 标签)

重组人 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (His 标签)

重组人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 (Fc 标签)

重组小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白

重组大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 标签)

重组大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 标签)

重组小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 标签)

重组小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 标签)

重组小鼠 M-C

鸡肺动脉内皮细胞Radix ginseng人参探针法PCR鉴定试剂盒中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-4周TCTP 翻译控制瘤蛋白抗体规格: 0.1ml

Ndumu Virus恩杜姆病毒RT-LAMP试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周Sortilin/NTR3/Gp95 神经降压素受体3抗体（糖蛋白95）规格: 0.2ml

Raccoonpox virus浣熊痘病毒探针法荧光定量PCR试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周KLHL7 kelch样蛋白7抗体规格: 0.2ml

Pasteurella multocida兔巴氏杆PCR试剂盒动物病原微生物检测（科研用） 50次低温负20度一年 2-4周CCDC68/se57-1 卷曲螺旋结构域蛋白68抗体(皮肤T淋巴细胞相关抗原) 规格: 0.2ml

虎源性成分LAMP试剂盒种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周Prkg1/cGKI cGMP依赖性蛋白激1抗体规格: 0.1ml

Stenotrophomonas maltophilia嗜麦芽窄食单胞探针法荧光定量PCR试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周ESYT2/FAM62B 延伸突触蛋白2抗体规格: 0.2ml

Prunus Necrotic Ringspot Virus(PNRSV)李属坏死环斑病毒RT-PCR试剂盒植物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周ARK5 AMPK的相关蛋白激5抗体规格: 0.2ml

Fructus aristolochiae马兜铃PCR鉴定试剂盒中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-4周Rabbit anti-Biotin whole serum 兔抗抗清规格: 1ml

Avian Leukosis Virus(ALV)禽白血病病毒G亚群RT-LAMP试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周Goat anti-Mouse IgM whole serum 羊抗小鼠IgM抗清规格: 1ml

Epizootic Hemorrhagic Disease Virus(EHDV)流行性出血热病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周phospho-Myosin light chain(Ser20) 磷酸化肌球蛋白轻链抗体规格: 0.1ml