鸡卵泡基膜细胞-上海邦景实业有限公司

货号	BJ-X96998

细胞培养步骤:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

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产品名称	鸡卵泡基膜细胞
规格	5×10⁵Cells/T25培养瓶
货号	BJ-X96998

商品属性：

名称 鸡卵泡基膜细胞

2.组织来源：鸡卵泡组织

3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

鸡卵泡基膜细胞分离自鸡卵泡组织；成熟卵泡是卵巢的组织结构成分之一，卵泡腔很大，卵丘很明显。卵泡内膜细胞紧靠卵泡颗粒层，与颗粒层细胞之间有一层基膜相隔，内膜细胞呈多边形，胞质清亮，胞核圆形，细胞间可见许多毛细血管，外膜细胞位于最外层，多呈梭形，与周围结缔组织分界不明显。卵泡（follicle）中卵母细胞四周有一层菱形或扁平细胞围绕，在卵泡开始发育、卵细胞成长的同时，周围的菱形细胞变为立方形，并由单层增生成复层，因其细胞浆内含有颗粒，故称为颗粒细胞。初级卵泡的颗粒细胞为单层；次级卵泡的颗粒细胞增至复层；成熟卵泡的颗粒细胞展开又变为单层。颗粒细胞的胞核大而圆，着色深，细胞的游离面有许多细长突起伸入放射带的凹陷部。

5.方法简介：

()实验室分离的鸡卵泡基膜细胞采用先机械分离后胶原酶反复消化法、并通过专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测：

()实验室分离的鸡卵泡基膜细胞经3β-HSD免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

产品货号CM-C002

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态成纤维细胞样

传代特性可传2-3代

消化液0.25%

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%

图片13.jpg

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

重组人 CXCL14 / BRAK 蛋白

重组人 CCL27 / CTACK 蛋白 (His 标签)

重组狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 标签)

重组狗 CXCL13 / BCA-1 蛋白 (His 标签)

重组狗 CXCL12 / SDF-1 蛋白

重组食蟹猴 IL-8 / CXCL8 蛋白

重组食蟹猴 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白

重组小鼠 CXCL12 / SDF-1 蛋白

重组人 I-TAC / CXCL11 蛋白

重组食蟹

鸡卵泡基膜细胞Avian Paramyxovirus 3(APMV)禽副粘病毒3型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周Rabbit Anti-human IgG/Gold 胶体金标记的兔抗人IgG 规格: 0.5mlPHKG2 磷酸化激γ2 规格: 0.2ml

Ramulus mori桑枝染料法PCR鉴定试剂盒中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-4周API2 凋亡抑制因子2抗体规格: 0.2mlGRIM19 干扰素/维甲酸诱导凋亡相关基因抗体规格: 0.1ml

Porphyromonas gingivalis 牙龈卟啉单胞LAMP试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周ZWILCH 着丝粒ZWILCH蛋白抗体规格: 0.2mlLRPAP1/MRAP 脂蛋白受体相关蛋白抗体（脂蛋白相关蛋白的相关蛋白1）规格: 0.1ml

Clostridium chauvoei气肿疽梭状芽孢杆探针法荧光定量PCR试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周Bcl-2 Bcl-2抗体规格: 0.1mlCCL23/MIP3 巨噬细胞性蛋白抗体规格: 0.1ml

Fructus toosendan川楝子LAMP鉴定试剂盒中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-4周Phospho-IRAK1 (Thr387) 磷酸化白介素-1受体相关激1抗体规格: 0.1mlC19orf47 19号染色体开放阅读框47抗体规格: 0.2ml

Rhodococcus equi马红球LAMP试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周Aldolase C 醛C抗体规格: 0.2mlHPV16-E7 人类状瘤毒16-E7抗体规格: 0.2ml

O'nyong-nyong Virus(ONNV)阿尼昂-尼昂病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周ADCY9 苷酸环化9抗体 0.2mlCAMK1D 钙调蛋白激CaMK1D抗体规格: 0.2ml

Radix sanguisorbae地榆LAMP鉴定试剂盒中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-4周CTGF 结缔组织生因子抗体规格: 0.1mlGoat Anti-Mouse IgG/HRP 辣根过氧化物标记的羊抗小鼠IgG 规格: 0.1ml

Listeria spp.李斯特通用LAMP试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周PLAGL1/ZAC1 多型性瘤基因样蛋白1抗体规格: 0.2mlC17orf42 17号染色体开放阅读框42抗体规格: 0.2ml

Sammarez Reef病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次低温负20度一年 2-3周UXT/Ubiquitously expressed transcript 广泛表达转录蛋白UXT抗体规格: 0.2mlBEND5 BEN结构域蛋白5抗体规格: 0.2ml