大鼠肌源性干细胞 返回列表页

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商品属性：

细胞培养步骤:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

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琼脂培养基B 英文名称：Agar medium B (Casein soya bean digest agar) 产品规格：250g

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大鼠肌源性干细胞Duck Hepatitis B Virus(DHBV)鸭乙型肝炎病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周HMG14/HMGN1  高迁移率核小体结合蛋白1 规格: 0.1mlGoat Anti-human IgM/AP  碱性磷酸（AP）标记的羊抗人IgM 规格: 0.1ml

Herba taxilli桑寄生LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周MAP-9  微管相关蛋白9抗体 规格: 0.2mlATXN7L3B  共济失调7样蛋白3B抗体 规格: 0.2ml

Bovine Herpes Mammillitis Virus(BHMV)牛疱疹炎病毒LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周TACC1  、胃抗原GA55抗体 规格: 0.2mlATG3  自噬相关蛋白3抗体 规格: 0.1ml

Histoplasm spp.组织胞浆通用探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周HIV p55+P6-Gag  艾滋毒抗体 规格: 0.2mlFAM91A1  FAM91A1蛋白抗体 规格: 0.2ml

erwinia carotovora subsp atroseptica胡萝卜软腐欧文氏马铃薯黑胫亚种PCR试剂盒 植物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Phospho-CDK2 (Thr160)  磷酸化周期素依赖性激2抗体 规格: 0.1mlMCPIP1  单核细胞趋化诱导蛋白1抗体 规格: 0.2ml

Fructus psoraleae补骨脂PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Rabbit Anti-Monkey IgM/HRP  辣根过氧化物标记的兔抗猴IgM 规格: 0.1mlENPP1  核苷酸内焦磷酸/磷酸二酯1抗体 规格: 0.1ml

Cache Valley Virus(CVV)卡奇谷病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Integrin alpha 2b/CD41  小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗体 规格: 0.1mlCA13  碳酸酐 规格: 0.2ml

Chikungunya Virus(CHIKV)基孔肯尼雅病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Rabbit Anti-mouse IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的兔抗小鼠IgG 规格: 0.1mlPhospho-HSP27 (Ser82)  磷酸化热休克蛋白27抗体 规格: 0.1ml

Natrii sulfas染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Calpain 2  钙激活的中性蛋白2抗体 规格: 0.1mlATG18/WIPI1  自噬相关蛋白18抗体 规格: 0.2ml

Erysipelothrix spp丹毒丝属通用LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Mouse Anti-Goat IgG  小鼠抗羊IgG 规格: 1mgProteasome 20S C2  蛋白体PSMα1抗体 规格: 0.2ml

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。