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货号 | BJ-X97522 |
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细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
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产品名称 | |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
货号 | BJ-X97522 |
商品属性:
名称 小鼠骨内膜间充质干细胞 2.组织来源:股骨、胫骨 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 小鼠骨内膜间充质干细胞分离自股骨、胫骨;骨内膜是一层致密结缔组织膜,覆盖在骨的表面(关节面除外),新鲜骨内膜呈粉红色,含有丰富的血管、神经和成骨细胞。此外,附着于骨的肌腱、韧带于附着部位都与骨内膜编织在一起。因而骨内膜与骨质结合甚为牢固。骨内膜富含血管、神经,通过骨质的滋养孔分布于骨质和骨髓。骨内膜分内、外两层,外层主要是粗大的胶原纤维束,部分纤维穿入骨质,使骨内膜固定于骨面;内层疏松,含成骨细胞和破骨细胞(分别具有产生新骨质和改建骨的功能)。骨髓腔和骨松质的网眼也衬着一层菲薄的结缔组织膜,叫做骨膜。骨内膜的内层和骨膜有分化成骨细胞和破骨细胞的能力,以形成新骨质和破坏、改造已生成的骨质,所以对骨的发生、生长、修复等具有重要意义。骨内膜间充质干细胞是一种具有高度自我更新能力和多向分化潜能的干细胞,可以向骨、软骨、肌组织、皮肤、脂肪、神经等多种组织分化,因此可以作为组织工程中的种子细胞。骨内膜间充质干细胞的体外培养条件要求较高,在培养过程中,受贴壁时间、种植密度、血清含量、培养温度和培养基pH值等条件的影响。 5.方法简介: ()实验室分离的小鼠骨内膜间充质干细胞采用冲洗骨髓、消化骨内膜、差速贴壁法结合培养基筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: ()实验室分离的小鼠骨内膜间充质干细胞经CD29、CD44免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M171 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传2-3代 消化液0.25% 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
牛热休克蛋白70(HSP-70)免疫试剂盒进口、组装
人前颗粒蛋白(PGRN)免疫试剂盒进口、组装
人精胺合成(SRM)免疫试剂盒现货供应
人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)免疫试剂盒进口、组装
猫雌二醇(E2)免疫试剂盒现货供应
大鼠血管紧张素原(aGT)免疫试剂盒进口、组装
大鼠肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)免疫试剂盒现货供应
阴沟肠杆菌分离琼脂(ECIA) 英文名称:Enterobacter Cloacae Isolation Agar 产品规格:250g
乳糖发酵ows\system32\EhStorShell.dll
小鼠骨内膜间充质干细胞Cortex albiziae合欢皮染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周CCL24 嗜酸粒细胞趋化蛋白24抗体 规格: 0.2ml
Duck Hepatitis Virus 2(DHV-2)鸭肝炎病毒2型RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Goat Anti-rabbit IgG/FITC FITC标记的羊抗兔IgG 规格: 0.3ml
Clonorchis sinensis中华枝睾吸虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周CK2 细胞角蛋白2抗体 规格: 0.1ml
Galla chinensis五倍子探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周GLUT8 葡萄糖转运蛋白8抗体 规格: 0.2ml
Propionibacterium acnes痤疮丙酸杆LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Phospho-Zyxin (Ser142/Ser143) 磷酸化斑联蛋白抗体 规格: 0.1ml
Taenia saginata肥胖带绦虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周PFK2/PFKFB3 6磷酸果糖激2抗体 规格: 0.2ml
Vancomycin-Resistant Enterococcus(VRE)耐万古肠球vanA/vanB双重染料法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周GABARAPL1 γ氨基丁酸受体相关蛋白样1抗体 规格: 0.2ml
Duck Tambusu Virus(TMUV)鸭坦布苏病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Histone H2B 组蛋白H2B抗体 规格: 0.1ml
Hepatitis D Virus(HDV)丁型肝炎病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周HSD11B1/HSD1 羟基类固醇脱11β1抗体 规格: 0.1ml
Rathayibacter rathayi鸭茅蜜穗病PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周DRD2 多巴胺受体D2抗体 规格: 0.1ml
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