RT-112（膀胱癌细胞) 返回列表页

细胞培养步骤:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

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商品属性：

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

人 Carboxypeptidase A2 / CPA2 ELISA配对抗体

人 KSP-Cadherin / Cadherin-16 / CDH16 ELISA配对抗体

人 Carbonic Anhydrase XII / CA12 ELISA配对抗体

人 CD86 / B7-2 ELISA配对抗体

人 VWC2 ELISA配对抗体

人 Tie1 ELISA配对抗体

人 MMP-8 ELISA配对抗体

人类缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp120 / Glycoprotein 120 ELISA配对抗体

人

RT-112（膀胱癌细胞)羊源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Adenylate kinase 2/AK2  苷酸激1抗体 规格: 0.2mlPhospho-FoxO1 (Ser256)  磷酸化叉蛋白家族1抗体 规格: 0.1ml

Babesia divergens分歧巴贝斯虫LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周phospho-ATF2(Ser322)  磷酸化活化复制因子2抗体 规格: 0.1mlPhospho-CRMP2 (Thr514+Ser518)  磷酸化二嘧啶样2抗体 规格: 0.1ml

Avian Leukosis Virus(ALV)禽白血病病毒通用探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周GLCCI1  糖皮质激素诱导转录蛋白1抗体 规格: 0.2mlTPH2  5色羟化2抗体 规格: 0.2ml

Thallus laminariae昆布探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Microsporidia protien  蜜蜂微孢子虫蛋白抗体 规格: 1mlWASF2  WASF2抗体 规格: 0.2ml

Adeno-associated Virus(AAV)腺伴随病毒LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 1-2周PH-4/P4H-TM  脯水解4抗体 规格: 0.2mlPhospho-CaMKII (Thr286)  磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激2α抗体 规格: 0.1ml

Perkinsus派琴虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周COPS4  信号转导蛋白亚基4抗体 规格: 0.2mlDonkey anti-Goat IgG whole serum  驴抗羊IgG抗清 规格: 1ml

Herba cirsii小蓟LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周VPS4a  液泡分选蛋白4抗体 规格: 0.2mlC9ORF46  9号染色体开放阅读框46抗体 规格: 0.2ml

骡源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周JNK1/2/3  氨基末端激1/2/3抗体 规格: 0.1mlMARCH2  膜相关环指蛋白2抗体 规格: 0.2ml

Chicken Embro Lethal Orphan Virus(CELOV)鸡胚致死孤儿病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周PAX4  配对盒同源基因4抗体 规格: 0.1mlABHD14B  水解结构域蛋白14B抗体 规格: 0.2ml

Peach X-disease phytoplasma桃X病植原体PCR试剂盒 植物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Rabbit Anti-horse IgG/Gold  胶体金标记的兔抗马IgG 规格: 0.5mlVAV3