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货号 | BJ-X97022 |
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细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
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产品名称 | |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
货号 | BJ-X97022 |
商品属性:
名称 鸡前脂肪细胞 2.组织来源:脂肪组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 鸡前脂肪细胞分离自脂肪组织;脂肪组织主要由大量群集的脂肪细胞构成,聚集成团的脂肪细胞由薄层疏松结缔组织分隔成小叶;贮存的脂肪,在需要时可迅速分解成甘油和脂肪酸,经血液输送到各组织以供利用。它们影响胰岛素敏感性、血压水平、内皮功能、纤溶活动及炎症反应,参与多种重要病理生理过程;脂肪组织已由过去单纯作为能量储存的器官而成为一个极其重要的内分泌系统。脂肪组织在体内含有两种主要的细胞:一种是在胞浆内积聚脂滴的成熟脂肪细胞;另一种是虽未在胞浆内积聚脂滴但有这种潜能的前脂肪细胞。前脂肪细胞呈梭形,有分裂和增殖的能力;成熟的脂肪细胞呈圆形,已经失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化能力的特异化前体细胞,与肥胖有着非常密切的关系。前脂肪细胞是一种类成纤维细胞,在演变的过程中不断吸收脂质,最终成为成熟的脂肪细胞。前脂肪细胞对外界机械损伤的抵抗力较强,可望成为软组织缺损的有益填充物。 5.方法简介: ()实验室分离的鸡前脂肪细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: ()实验室分离的鸡前脂肪细胞经油红O染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-C006 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传5代左右;3代以内状态最佳 消化液0.25% 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
重组狗 IL33 / Interleukin-33 / NF-HEV 蛋白
重组人 IL37 / IL1F7 / IL-1H4 蛋白
重组小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白
重组人 IL36G / IL1F9 蛋白
重组狗 IL-1 beta / IL1B 蛋白
重组人 IL1F6 / IL36A 蛋白
重组人 IL36B / IL1F8 蛋白
重组食蟹猴 IL-1 beta / IL1B 蛋白
重组大鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (mature form)
重组小鼠 IL-1 beta
鸡前脂肪细胞Inini病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周KAT3B/Ep300 转录接蛋白EP300抗体 规格: 0.2mlCCDC124 卷曲螺旋结构域蛋白124抗体 规格: 0.2ml
Capillaria contorta捻转毛细线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Collagen V Ⅴ型胶原抗体 规格: 0.1mlB2 相关蛋白2抗体 规格: 0.1ml
Herba pogostemonis广藿香LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Rabbit Anti-Goat IgG/Gold 胶体金标记的兔抗羊IgG 规格: 0.5mlADRA1/ADRA1B/alpha 1 Adrenergic Receptor alpha 1上素能受体抗体 规格: 0.1ml
Yaba Monkey Tumor Virus(YMTV)亚巴猴肿瘤病毒病毒LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Phospho-HSP27 (Ser254) 磷酸化热休克蛋白27抗体 规格: 0.1mlNCE2 泛素结合E2F抗体 规格: 0.2ml
Mycobacterium hominis人分枝杆探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周γ-Catenin γ-连环素/连接蛋白γ抗体 规格: 0.2mlIGFR3/CD16 FC段γ受体3/免疫球蛋白G Fc段受体III抗体 规格: 0.1ml
Apricot chlorotic leafroll phtoplasma杏褪绿卷叶植原体PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Salmonella enteritidis/SE 肠沙门氏菌抗体 0.2mlTHRA1+2 甲状激素受体α1+α2抗体 规格: 0.2ml
Eperythrozoon suis猪附红 体(猪嗜血支原体)LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用) 50次 低温 负20度 一年 2-3周Goat Anti-Mouse IgG/Cy5 Cy5标记的羊抗小鼠IgG 规格: 0.1mlTNFAIP2 瘤坏死因子诱导蛋白2(TNFα-IP 2)抗体 规格: 0.2ml
Sepik Virus塞皮克病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周JWA JWA蛋白抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗猴IgG 规格: 0.1ml
Brome Mosaic Virus(BMV)雀麦草花叶病毒RT-PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Intra Acrosomal Protein/SP10 子顶端体蛋白10抗体 规格: 0.2mlCDKN2C/p18 INK4c 细胞周期蛋白依赖性激抑制剂2C抗体 规格: 0.2ml
Porcine Reovirus猪呼肠孤病毒RT-PCR试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周phospho-MAP4K4(Ser631) 磷酸化丝裂原活化蛋白激MAP4K4抗体 规格: 0.1mlphospho-DDX58 (Thr170) 磷酸化DDX58抗体 规格: 0.1ml
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