当前位置:上海邦景实业有限公司>>PCR检测试剂盒>>荧光定量PCR试剂盒>> 牛皮蝇蛆PCR荧光定量检测试剂盒 分子生物学仪器
产地 | 国产 | 加工定制 | 否 |
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适用领域 | 科研 | 货号 | BJ-P6881 |
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
牛皮蝇蛆PCR荧光定量检测试剂盒 | Hypoderma bovisPCR | 多种规格 | BJ-P6881 |
特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
储存条件:-20℃以下,有效期12个月。
二、操作步骤 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 | 三、注意事项 1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。设立一个专用的PCR实验室。 2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。 3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。 4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。 5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。 6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。 7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
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操作流程
1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器 、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 所有试剂在使用应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用应全部转移至标本准备区,并单独存放。
6. 为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
96支 10 μL RNase-free 白吸头(盒装已灭菌) 常温 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 8, mitochondrial
50mL Western印迹膜抗体清除剂 Western Blot Antibody Erasol 室温保存 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Frizzled-1
5g 双 (2- ) 亚氨基三 ( 羟甲基 ) 甲烷 Bis-Tris 室温干燥保存 78-5000 pg/mL 人DNA末端核苷酸转移(DNA nucleotidylexotransferase)ELISA试剂盒
100mL YPDG液体培养基 YPG Liquid Medium 常温精肉汤进口、国产Arginine Broth acc. To Schubert用于游泳池中假单胞菌检测(Merck方法)250
2 ug pHR pHR 低温运输,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人丝甘蛋白聚糖(Serglycin)ELISA试剂盒
5mL 成骨生长因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存 78-5000 pg/mL 人脑啡肽原B(Proenkephalin-B)ELISA试剂盒
250mL HEPES Lysis Buffer with Triton HEPES Lysis Buffer with Triton 常温保存 78-5000 pg/mL 人丰富酸性蛋白1(PRAP1)ELISA试剂盒
50次 M膜结合DNA清除试剂盒 Membrane-Bound DNA Erasol -20℃保存,通用洗柱液和RNA洗脱液可以室温保存胰胨大豆琼脂斜面进口、国产Tryptic Soy Agar250克培养副溶血性弧菌,做 色素氧化实验
2 ug pLVX-mCherry-C1 pLVX-mCherry-C1 低温运输,-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人αN已酰氨基葡糖苷(αNAG)ELISA试剂盒
10g 酸洗玻璃珠 Acid-Washed Glassbeads 常温
250mL Galactose Solution(半乳糖溶液),20%(W/V) Galactose Solution,20%(W/V) 常温保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Macrophage mannose receptor 1
牛皮蝇蛆PCR荧光定量检测试剂盒黑色标本保色液 2×250ml
紫色标本保色液 2×250ml
蓝色标本保色液 2×250ml
钙盐染色液(茜素红S法) 2×50ml
钙盐染色液(改良茜素红S法) 3×50ml
抑制剂激活剂
Caspase 4 Inhibitors Z-VAD-FMK Ac-YVAD-FMK(caspase 4 抑制剂) 20μl
Caspase 6 Inhibitor Z-VE(OMe)ID(OMe)-FMK Ac-VEID-FMK(caspase 6 抑制剂 ) 20μl
Caspase 8 Inhibitors Ac-IETD-FMK Z-LETD-FMK(Caspase 8 抑制剂) 20μl
Caspase 9 Inhibitors Ac-LEHD-FMK Z-LE(OMe)HD(OMe)-FMK(Caspase 9 抑制剂) 20μl
Caspase 10 Inhibitors Z-AEVD-FMK Ac-AEVD-FMK(caspase 10 抑制剂) 20μl
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