IL-11elisa试剂盒试验时须注意以下的一些细节:
1、实验板孔加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应孔的孵育时间一致。
2、固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维 素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。
3、包被抗体或抗原的选择:将抗体或抗原吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一 般要求PH在9.0~9.6之间。
4、酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定。然后再固定其 它条件或采取“方阵法",在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
5、取出板条前恢复到室温后再打开外包装袋,实验中不用的板条立即放回包装中,密闭封口,其余不用试剂应盖好。
6、实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
7、洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水。
8、试剂盒内试剂请在保质期内使用,不同批号试剂不要混用。
9、酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而 本身无色。有些供氢体有潜在的致癌作用,ELIAS试剂盒应注意防护。
10、1000pg/ml以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到的结果。大于1000pg/ml 的样品应以标准稀释缓冲液稀释后重做。在结果分析时,结合考虑相应的稀释度。
11、按猪ELISA试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于 洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用 试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。
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