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大鼠elisa试剂盒操作过程:
1.运用前,将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫,避免加样时参加很多的气泡,发生加样上的误差。
2.依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自己的数量来定,能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后参加50ul于反响孔内。
3.参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。立即参加50ul的生物素符号的抗体。盖上膜板,悄悄振动混匀,37℃温育1小时。
4.甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
5.每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP,悄悄振动混匀,37℃温育30分钟。
6.甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
7.每孔参加底物A、B各50ul,悄悄振动混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8.取出酶标板,迅速参加50ul终止液,参加终止液后应立即测定成果。
9.在450nm波利益测定各孔的OD值。
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