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大鼠elisa试剂盒注意方法的几点

时间:2020/9/16阅读:339
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大鼠elisa试剂盒操作方法:

1.包被抗体:用包被缓冲液稀释特异性抗体球蛋白至*适浓度(1~10μg/ml),每凹孔加0.3ml,4℃过夜,或37℃水浴3小时,贮存冰箱。

2.洗涤:移去包被液,凹孔用洗涤缓冲液(含0.05%吐温-20)洗3次,每次5分钟。

3.分2组,a组加酶标记抗原和被检抗原混合液0.2ml,b组只加酶标记抗原液0.2ml,37℃作用1~2小时。(混合液可作成不同稀释度)

4.洗涤:移去包被液,凹孔用洗涤缓冲液(含0.05%吐温-20)洗3次,每次5分钟。

5.加入0.2 ml底物溶液于每个凹孔(OPD或OT),室温作用30分钟(另作一空白对照,0.4ml底物加0.1ml终止剂)。

6.加终止剂:每凹孔加2M H2SO4或2M柠檬酸0.05ml。

7.用酶标比色计测定a、b两组OD值,并求出a、b、OD值的差数。

大鼠elisa试剂盒注意事项:

1.实验操作时需戴手套、穿工作衣,严格健全和执行消毒隔离制度,各种实验废弃物都应按传染物处理。

2.终止液具有腐蚀性,应避免接触皮肤和衣物,如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。

3.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋,未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。

4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶,使用时需恢复至室温以*溶解。

5.洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。

6.用于检测的样品应保持新鲜。

7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。

8.不同批号试剂组分不得混用。

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