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一种去除免疫球蛋白的新生牛血清方法:
一、新生牛血清采集:
首先对新生牛血清来源的牛群进行健康状况调查,选择无特定病原的黑白花奶牛生下的健康新生公牛(新生公牛不能吃初乳),通过无菌手术的方法在新生公牛颈静脉采血,将采集到的新生牛血液用大容量冷冻离心机分离血清,将分离得到的牛血清置‑20℃冷冻保存备用。
二、新生牛血清过滤:
将冷冻保存的新生牛血清解冻后进行过滤。
1、第一次过滤新生牛血清,选取膜孔径0.2微米、膜管面积0.5m2的陶瓷复合膜过滤装置,膜管置高温蒸汽压力灭菌锅内,在蒸汽温度120℃、压力0.1MPa条件下灭菌30分钟,待膜管冷却至常温时过滤新生牛血清,过滤时,调节回流管阀门控制回流液流量,使膜管进口流体压力与出口流体压力差保持在0.2MPa,流体温度≤40 ℃;将收集得到的滤液立即进行第二次过滤。
2、第二次过滤新生牛血清,选取膜孔径0.1微米、膜管面积0.5m2的陶瓷复合膜 过滤装置,膜管置高温蒸汽压力灭菌锅内,在蒸汽温度120℃、压力0.1MPa条件下 灭菌30分钟,待膜管冷却至常温时过滤新生牛血清,过滤时,调节回流管阀门控制 回流液流量,使膜管进口流体压力与出口流体压力差保持在0.2MPa,流体温度≤40 ℃;将收集得到的滤液立即进行第三次过滤。
3、第三次过滤新生牛血清,选取孔径0.05微米、膜管面积0.5m2的陶瓷复合膜过滤装置,膜管置高温蒸汽压力灭菌锅内,在蒸汽温度120℃、压力0.1MPa条件下灭菌30分钟,待膜管冷却至常温时过滤新生牛血清,过滤时,调节回流管阀门控制回流液流量,使膜管进口流体压力与出口流体压力差保持在0.2MPa,流体温度≤40 ℃;收集得到的滤液为无免疫球蛋白新生牛血清。
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