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细胞培养实验操作规范条例

时间:2025/4/7阅读:145
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    细胞培养中,细胞间交叉污染并不罕见,多是由于在培养中操作时各种细胞同时进行,混杂使用器皿和液体所致,这种污染能使细胞的生长特性、形态特征等发生变化,有些变化较轻、不易察觉,有些可能由于污染的细胞具有生长优势最终压过原来细胞而导致细胞的生长抑制,最终死亡。常用观察细胞形态学、分析生长特性和核型、检测细胞的标记物等方法检测交叉污染的细胞。

操作规范条例:

1、操作时,试剂不用尽量及时盖上盖子,每开一个试剂要用酒精灯消毒。

2、从培养箱取放细胞前,用酒精清洁双手,尽量缩短开门时间和减少开门次数。

3、培养瓶放入培养箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精挥发后再放入,以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。

4、使用移液枪时,将容器倾斜以便于移液,切勿将枪杆碰触瓶口及内壁。一旦发生倒吸情况,要及时用酒精棉球擦拭,以免液体残留导致细菌滋生。

5、先取试剂、耗材,再取移液枪、装枪头。很多人习惯先an装枪头,然后去拿试剂、耗材,殊不知无意间枪头已经触碰其他地方导致污染。

6、冻存细胞时冻存管盖子需拧紧,复苏细胞时,从液氮罐取出冻存管,轻拧盖子,以确认盖子是否拧紧。镊子夹住冻存管盖子与管体交界处,在37度水浴锅中快速解冻,水面不可超过冻存管盖沿,不建议直接扔进水中,以免水渗入造成污染。


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