豚鼠降钙素基因相关肽elisa试剂盒的操作程序

豚鼠降钙素基因相关肽elisa试剂盒的操作程序：

1.　包被：用包被液将抗体稀释至蛋白质含量为0.5～20μg／ml，按100ul/孔加入酶标板，  4℃包被过夜。

2.　洗板：次日弃去孔内液体，在纸巾上轻轻扣打以吸去残留液体，加入洗涤液（约280-300ul/孔），漂洗2-3次，每次3-5min；

3.  封闭：按200-250ul/孔加入封闭液，室温2-3小时或37℃1-2小时，也可4℃封闭过夜，然后弃去孔内封闭液；

4.  样品处理：用洗涤液或样品稀释液将待检样品(含未知抗原)稀释至所需浓度； 

5.　标准液：用洗涤液或样品稀释液将标准液稀释至所需浓度（定性分析可省略本步骤）；

6.　加样：按排列顺序依次加入50-100ul/孔稀释好的标准液、处理过的待检样品、阴性对照及阳性对照，室温或37℃孵育30-60min；

7.  洗板：同步骤2；豚鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒 

8.　加酶标抗体：酶标抗体的稀释按产品说明书，按50-100ul/孔加入新鲜配制的酶标抗体，室温或37℃孵育1小时；

9.  洗板：同步骤2；  

10. 加底物液显色：按100-150ul/孔加入新配制的TMB底物溶液，室温避光反应15～30分钟。

11. 终止反应：于各反应孔中加入50ul的终止液。

12. 结果判定：可于白色背景上，直接用裸眼观察结果，豚鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可在酶标仪上于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处测OD值。检测时以空白对照孔调零后测各孔OD值，若样品孔中的OD值大于阴性对照孔的2.1倍，即为阳性。