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货号 | FS-01S63624 |
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规格:50管/24样
检测方法:可见分光光度法
货号:FS-01S63624
商品介绍:
测定意义 α-GC(EC 3.2.1.20)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化水解芳基或烃基与糖基之间的α-糖苷键生成葡萄糖,不仅与细胞壁的松弛或加固有关,而且与细胞识别和一些信号分子产生密切相关。 测定原理: α-GC分解对-硝基苯-α-D吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算α-GC活性。 自备用品: 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
猴泛特异性肽8 (USP8)联免疫试剂盒弓形虫(NT株)MDM2 (D1V2Z) Rabbit mAb
猴纤溶原激活物抑制因子1(PAI1)联免疫试剂盒 运动节杆COX IV (3E11) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate)
猴低密度脂蛋白受体(LDLR)联免疫试剂盒短短芽孢杆Lysine Methyltransferase Antibody Sampler Kit
猴内质网核信号1(ERN1)联免疫试剂盒根瘤Phospho-p53 (Ser15) (16G8) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
猴肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL/TNFSF10)联免疫试剂盒汉逊德巴利酵母Angiogenesis Antibody Sampler Kit
猴内皮受体A(ETRA)联免疫试剂盒根瘤Filamin C (D1K3J) Rabbit mAb
猴接触蛋白2(CNTN2)联免疫试剂盒银灰口蘑PRK2 (D10A10) Rabbit mAb
猴抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG Ab)联免疫试剂盒 亮白曲霉CD68 MultiMab™ Rabbit mAb
猴单核趋化蛋白1(MCP-1)联免疫试剂盒Cleaved Caspase Substrate Motif [DE(T/S/A)D] MultiMab™ Rabbit mAb mix
猴胃泌释放肽前体(ProGRP)联免疫试剂盒毛头鬼伞(鸡腿菇)Phospho-MOB1 (Thr35) (D2F10) Rabbit mAb
猴10kDa干扰γ诱导蛋白(IP-10/CXCL10)联免疫试剂盒枯草芽孢杆eIF4GI (D6A6) Rabbit mAb
猴核孔蛋白160kda(NUP160)联免疫试剂盒杨叶点霉CIAO1 (D4E2U) Rabbit mAb
猴白介1受体II(IL-1R2)联免疫试剂盒枯草芽孢杆Sorafenib
猴桥粒芯糖蛋白-1(DSG-E1)联免疫试剂盒 露湿漆斑LIN28A (D9F5) Rabbit mAb
猴雄受体(AR)联免疫试剂盒 金针菇(毛柄、冬菇)MAP2 (D5G1) XP® Rabbit mAb
α GCα葡萄糖苷酶检测试剂盒可见分光光度法有丝分裂周期蛋白MPP9抗体Human ODAM ELISA Kit白屈菜红
减数分裂特异核结构蛋白1抗体Human NXN ELISA Kit樟脑
肌球蛋白相互作用G蛋白交换因子抗体Human ODF2 ELISA Kit莰烯
珠蛋白1抗体Human ODF1 ELISA Kitβ-连环蛋白抗体流式组化
间充质同源盒蛋白2抗体Human ODF3 ELISA KitL-甘
G蛋白偶联受体MRGX1抗体Human NXN ELISA Kit磷酰二肽
黑色瘤相关抗原11抗体Human ODF2L ELISA KitN-乙酰-L-色
G蛋白偶联受体MAS相关蛋白抗体Human HSP90AA1(Heat shock protein HSP 90-alpha) ELISA Kit2"-O-没食子酰基金丝桃苷
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