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货号 | FS-01S63826 |
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产品名称:MnP锰过氧化物酶检测试剂盒微量法
规格:100管/96样
检测方法:微量法
货号:FS-01S63826
商品介绍:
测定意义 锰过氧化物酶(EC1.11.1.13)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,主要存在于担子菌中,属于木质素降解酶系,能有效的降解木质素及废水和土壤中比较难降解的氯化物,叠氮化合物、DTT,多环芳烃等。 测定原理 锰过氧化物酶在Mn2+存在的条件下,将愈创木酚氧化为四邻甲氧基连酚,在465nm有特征吸收峰。 自备实验用品及仪器 天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计、微量石英比色皿、恒温水浴锅。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
HAND2 心脏和神经嵴衍生蛋白2抗体 * 0.1ml
MYF5 生肌决定因子Myf5抗体 * 0.1ml
SCC112/PIG54 细胞增殖诱导蛋白54抗体 * 0.1ml
EBNA1/EBV Nuclear Antigen EB病核抗原1抗体 * 0.2ml
β-synuclein/SNCB 核突触蛋白β抗体 * 0.2ml
KDEL (ER Marker) 赖,天冬,谷,亮相关序列抗体 * 0.2ml
RAG1/RNF74 环指蛋白74抗体(重组激活基因1) * 0.2ml
POMC 阿黑皮原抗体 * 0.1ml
FBXL11 FBXL11蛋白抗体 * 0.2ml
ASAP1/DDEF1 发育分化增强因子1抗体 * 0.1ml
phospho-ER-beta(ser87) 磷化雌受体β抗体 * 0.1ml
phospho-ASAP1/DDEF1(Tyr782) 磷化发育分化增强因子1抗体 * 0.1ml
RAG2 重组激活基因2蛋白抗体 * 0.2ml
ASMTY/HIOMT 松果体N甲基乙酰羟色胺抗体 * 0.2ml
GNAO1/G0 Protein alpha G蛋白偶联受体结合蛋白O亚基A2抗体 * 0.2ml
MnP锰过氧化物酶检测试剂盒微量法荧光PE标记猪胰岛蛋白Anti-IKBKB Antibody小鼠垂体腺苷环化激活肽27(PACAP-27)elisa定量检测试剂盒
荧光PE标记血蓝蛋白Anti-IKZF2 Antibody小鼠白介1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)elisa定量检测试剂盒
荧光PE标记Anti-IKBKG Antibody小鼠甲状腺结合球蛋白(TBG)elisa定量检测试剂盒
荧光PE标记胰糜蛋白Anti-IKZF3 Antibody小鼠组织型纤溶原激活剂(t-PA)elisa定量检测试剂盒
荧光APC标记小鼠IgG(流式同型对照)Anti-IL11RA Antibody小鼠转录因子20(TCF20)elisa定量检测试剂盒
荧光APC标记大鼠IgG(流式同型对照)Anti-IL12A Antibody小鼠转铁蛋白(TRF)elisa定量检测试剂盒
荧光APC标记牛IgGAnti-IL13RA1 Antibody小鼠转化生长因子β4(TGF-β4)elisa定量检测试剂盒
荧光APC标记牛IgMAnti-IL15RA Antibody小鼠肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)elisa定量检测试剂盒
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