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产地 | 进口 | 加工定制 | 是 |
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适用领域 | 科研 |
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | |
英文名称 | Streptococcus pneumoniaePCR |
编号 | FS-R2190 |
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
RSPO1 Protein Human 重组人 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白 (His 标签)乙酸钠三水(分子生物学级)Sodium acetate, trihydrate质量规格:>99%,分子生物学级
人骨骼肌成肌细胞(HSkMM)(5×105) 小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs) Mouse脱叶灵,噻苯隆Thidiazuron质量规格:>98%,分子生物学级
中国仓鼠肺细胞;V79碘(AR)Iodine质量规格:>99.5%,AR
COL5A2 Others Human 人 COL5A2 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙醇脱氢酶ADA, Alcohol dehydrogenase 质量规格:>300U/mg,BR
CL-0045C-33 A(人子细胞)5×106cells/瓶×2吐温80(化学纯)Tween-80质量规格:CP
人胚胎胰腺组织来源细胞;CCC-HPE-2 人支气管平滑肌细胞*培养基 100mL咪唑司汀Mizolastine质量规格:>98.5%,BR
人羊膜细胞;WISH吗替麦考酚酯/霉酚酸酯Mycophenolate Mofetil质量规格:>99%,BR,可用于细胞培养
人肺动脉成纤维细胞 (HPAF)( 5×105 )吗替麦考酚酯/霉酚酸酯(标准品)Mycophenolate Mofetil质量规格:HPLC>98%,标准品
CL-0317AML-193(人急性单核细胞白血病单核细胞)5×106cells/瓶×2奈拉滨Nelarabine质量规格:>99.0%,细胞培养级
人胃癌细胞;MGC-803 大鼠胎儿表皮角质形成层细胞*培养基 100mL醋酸奈西立肽Nesiritide Acetate质量规格:>95%
RDFs, 大鼠真皮成纤维细胞 Rattus百里香酚,麝香草酚Thymol质量规格:AR
FGFR1 Others Mouse 小鼠 FGFR1 / CD331 人细胞裂解液 (阳性对照) Sulfo NHS;N-羟基硫代琥珀酰亚胺sulfo-NHS质量规格:>99%,BR
人肝永生化细胞;THLE-3亚甲兰,亚甲基蓝Methylene Blue质量规格:BS
EPD2 Others Human 人 PDase 2 / EPD2 (aa 29-460) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸沃尼妙林Valnemulin HCl质量规格:>97%,BR
CL-0388NCI-H157(人非小细胞肺腺癌细胞)5×106cells/瓶×2磷酸泰乐菌素Tylosin phosphate 质量规格:>95%,BR
肺炎链球菌PCR检测试剂盒供应商CSF2RB Others Human 人 CSF2RB / CD131 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸氟轻松;醋酸肤轻松质量规格:>98%,BRFluocinolone Acetonide
大鼠海马趾星形胶质细胞RA-h醋酸氟轻松;醋酸肤轻松(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Fluocinolone Acetonide
CHODL Others Rat 大鼠 CHODL / CHOndrolectin 人细胞裂解液 (阳性对照) 泊甙质量规格:>98%,BR,可用于细胞培养Etoposide
大鼠外周血白细胞*培养基 100mL泊甙(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Etoposide
Caki-2 人肾透明细胞癌细胞 Caki-2 human renal clear cell carcinoma cells McCoy's 5A Media (Modified with icine) 10%FBS依西美坦(企标)质量规格:>99%,BR,可用于细胞培养Exemestane
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