绵羊肺成纤维细胞（原代永生化） 返回列表页

产品属于：

产品名称：狗肾转化细胞    

产品英文：MDCK

货号：FS-01X9755

细胞培养条件：MEM+10%FBS+1%P/S  

生长状态：贴壁生长

产品规格：1×106

单位：T25/瓶

是否提供细胞STR鉴定：不提供STR鉴定报告

保存培养温度（℃）37

运输温度（℃）：常温   

细胞培养的优点：

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

注意事项：

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

人抗副流感病毒IgG抗体(anti-PIV IgG )ELISA试剂盒 英文名称：Human Poliomyelitis Virus,PV-IgG ELISA Kit规格:96T/48T

人大疱性类天疱疮抗体(BP)ELISA试剂盒英文名称：Human Bullous Pemphigoid,BP ELISA Kit规格:96T/48T

人肠病毒(Enterovirus)ELISA试剂盒英文名称：Human Enterovirus ELISA Kit规格:96T/48T

人冠状病毒(Coronaviruses IgG)ELISA试剂盒英文名称：Human Coronaviruses IgG ELISA Kit规格:96T/48T

人不耐热肠毒B亚单位(LTB)ELISA试剂盒 英文名称：Human heat-labile enterotoxin B subunit,LTB ELISA Kit规格:96T/48T

人阿米巴(Amebiasis)ELISA试剂盒英文名称：Human Amebiasis ELISA Kit规格:96T/48T

人白喉抗体(Diphtheria Ab)ELISA试剂盒英文名称：Human Diphtheria antibody ELISA Kit规格:96T/48T

人囊虫病抗体(CYT Ab)ELISA试剂盒英文名称：Human Cysticercosis antybody,CYT Ab ELISA Kit规格:96T/48T

人利什曼原虫抗体(Leishimaria Ab)ELISA试剂盒英文名称：Human Leishimaria antibody ELISA Kit规格:96T/48T

人瘢痕性天疱疮抗体(CP)ELISA试剂盒英文名称：Human cicatricial Pemphigoid,CP ELISA Kit规格:96T/48T

人乙型肝炎病毒前S2抗体(HBV preS2Ab)ELISA试剂盒英文名称：human hepatitis B virus,HBV preS2Ab ELISA Kit规格:96T/48T

人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA试剂盒英文名称：human hepatitis B virus,HBV preS2Ag ELISA Kit规格:96T/48T

人输血传播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)ELISA试剂盒英文名称：human transfusion transmitted virus,TTV ELISA Kit规格:96T/48T

人去加压/1-去基-8-右旋-精加压(dDAVP)ELISA试剂盒英文名称：Human /1-desamino-8-D-arginine vasopressin,dDAVP ELISA Kit规格:96T/48T

人毒蕈碱型乙酰受体亚型M3(M-AChR M3)ELISA试剂盒英文名称：Human muscarinic acetylcholine receptor M3,M-AChR M3 ELISA Kit 规格:96T/48T

人毒蕈碱型乙酰受体(M-AChR)ELISA试剂盒 英文名称：Human muscarinic acetylcholine receptor,M-AChR ELISA Kit规格:96T/48T

人食欲受体(OXR)ELISA试剂盒英文名称：Human Orexin receptor,OXR ELISA Kit规格:96T/48T

人真胰岛(TI)ELISA试剂盒 英文名称：Human true insulin,TI ELISA Kit规格:96T/48T
狗肾转化细胞PLRP1/PNLIPRP1  胰脂肪相关蛋白1抗体规格: 0.1ml

BMP15  骨形态发生蛋白15抗体规格: 0.1ml

BCAT1  胞浆支链基转抗体规格: 0.1ml

BMP5  骨形态发生蛋白5抗体规格: 0.1ml

Hepatic lipase  肝脂抗体规格: 0.2ml

GABA Transporter 1/GAT-1  γ基丁运载蛋白1抗体规格: 0.1ml

PAPPA  妊娠相关血浆蛋白A抗体规格: 0.1ml

PPT1  棕榈酰蛋白硫酯1抗体规格: 0.2ml