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产地 | 进口 | 加工定制 | 是 |
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适用领域 | 科研 |
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | |
英文名称 | Schistosoma mattheei,PCR |
编号 | FS-R2130 |
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
神经元细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)月桂酰-DL-肉毒碱氯化物Lauroyl-DL-carnitine chloride质量规格:美国进口
TF-1细胞,人血液白血病细胞 615小鼠状肺腺癌瘤株,P615细胞 人少突胶质前体细胞裂解物HOPCL1,2-二月桂酰-sn-甘油-3-胆碱磷酸1,2-Dilauroyl-sn-glycero-3-phosphocholine质量规格:美国进口
NCI-H838(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2更昔洛韦钠盐Ganciclovir Sodium Salt质量规格:美国进口
Caco-2(人结直肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0030Bcap-37(人癌细胞)5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纤维细胞;C3H 10T1/2 2A6(S)-更昔洛韦-5'-三磷酸锂盐(S)-Ganciclovir-5’-triphosphate Lithium Salt质量规格:美国进口
猪静脉血管内皮细胞;ZYM-SVEC01更昔洛韦-d5Ganciclovir-d5质量规格:美国进口
Chang liver细胞,CCL13张氏肝细胞正常 人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293),APP-PS1细胞 豚鼠皮肤细胞;GP-S3滂胺天蓝(~50%,BS)Chicago sky blue 6B质量规格:~50%,BS
Lncap clone FGC(人前列腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2氯铵-T三水(>98%,BR)Chloramine T, trihydrate质量规格:>98%,BR
Promocell C-20111 Keratinocyte GrowthMedium 2 KIT, 角质细胞生长培养基2型套装 500ml,卡拉唑E(>70%,BS)Chlorazol black E质量规格:>70%,BS
人主动脉内皮细胞HAEC氯金酸三水Chloroauric acid, hydrate质量规格:BR;水溶液,Au在23.5-23.8%
FAM3D Others Human 人 FAM3D 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙酸胆固醇酯(>96%,BR)Cholesteryl acetate质量规格:>96%,BR
HEPG2.2.15 肝癌细胞HBV病毒株草酰乙酸Oxaloacetic acid质量规格:>97%,BR
CL-0290MDA-MB-468(人癌细胞)5×106cells/瓶×2硫酸锌七水(AR)Zinc sulfate, heptahydrate质量规格:>99.5%,AR
RLF, 大鼠淋巴成纤维细胞酒石酸钾钠四水Potassium sodium tatrate, tetrahydrate质量规格:>98%,BR
双位点HC-kit受体细胞株;DMF7 人子宫内膜上皮细胞*培养基 100mL缩二脲Biuret质量规格:>98%,BR
人脊髓星形胶质细胞总RNAHA-sp NA硫酸镁无水(分子生物学级)Magnesium sulfate anhydrous质量规格:>99%,分子生物学级
,羊血吸虫PCR检测试剂盒价格杂交瘤(B类);Z172A4C4C6F3G12 Butt's 淋巴瘤细胞,Raji细胞 HBZY-1细胞,大鼠肾小球系膜细胞EC(HBZY-1)维生素B6,盐酸吡哆醇Vitamin B6 Hydrochloride质量规格:>98%,BR
UM-UC-3, 人膀胱移行细胞癌 Human维生素B6(标准品)vitamin B6质量规格:HPLC≥99%,标准品
LILRB3 Others Human 人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 人细胞裂解液 (阳性对照) (+)-5-反式氯前列醇(+)-5-trans Cloprostenol质量规格:美国进口
动物星形胶质细胞培养基AM-a(+/-)-氯前列醇钠盐水合物(+/-)-Cloprostenol sodium salt hydrate质量规格:美国进口
IFNA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 人细胞裂解液 (阳性对照) (+)-氯前列醇(+)-Cloprostenol质量规格:美国进口
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
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