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| 货号 | FS-X9742 |
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中文名称：JC-10荧光探针
英文名称：JC-10
产品规格：1mg|5mg
货号：FS-X9742
产品介绍:
JC-10是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm的理想荧光探针。可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时，JC-10聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，可以产生红色荧光；在线粒体膜电位较低时，JC-10不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-10为单体，可以产生绿色荧光。这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。激发波长Ex510nm，发射波长Em525nm。 线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。通过JC-10从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，同时也可以用JC-10从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。JC-10单体的大激发波长为515nm，大发射波长为529nm；JC-10聚合物的大激发波长为585nm，大发射波长为590nm。实际观察时，使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。 储存条件：-20℃干燥避光保存，保质期12个月。 |
培养操作步骤：
1．公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
糖蛋白130(gp130/CD130)英文名：gp130/CD130 蛇巴曲抗体包装5g
瘦受体(Leptin receptor)英文名：Leptin receptor BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体包装100ml
瘦受体(LEPR)英文名：LEPR Bax抗体包装25ml
瘦(LEP/Leptin)英文名：LEP/Leptin Bcl-2抗体包装500ml
噬性细胞趋化因子(Eotaxin)英文名：Eotaxin 脑源神经营养因子抗体包装1g
嗜性粒细胞趋化因子(Eotaxin)英文名：Eotaxin 碱性成纤维生长因子抗体包装250mg
生长调节致癌基因α(GROα/CXCL1/MGSA)英文名：GROα/CXCL1/MGSA 癌转移抑制基因1抗体包装100ml
生长分化因子15(GDF-15)英文名：GDF-15 牛血清白蛋白抗体包装25ml
神经趋化蛋白(fractalkine/CX3CL1)英文名：fractalkine/CX3CL1 β-酪蛋白抗体包装5ml
凝集样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)英文名：LOX-1 β葡聚糖受体抗体包装100g
苗条受体(Leptin receptor)英文名：Leptin receptor 蛇蛋白巴曲抗体包装500g
苗条(OB)英文名：OB 非受体性蛋白酪激ETK抗体包装25mg
苗条(LEP)英文名：LEP 磷化非受体性蛋白酪激ETK抗体包装25g
粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF/CSF2)英文名：GMCSF/CSF2 磷化相关死亡促进因子抗体包装5g
可溶性E选择(sE-selectin)英文名：sE-selectin BarX1蛋白抗体包装100g
染色体脆弱性相关基因抗体干扰α4(IFNα4)Epirubicin hydrochloride (4'-Epidoxorubicin hydrochloride) 是阿霉的半合成的 L-阿拉伯糖衍生物，能
JC-10荧光探针阪崎肠杆 D-(+)-二苯甲酰囊虫病抗体
黑曲霉 米那普仑盐酸盐脑啡肽
环状芽孢杆 富马酸钠脑钠;脑钠尿肽
Rhizobium multihospitium 酸三环癸烯酯内
酿酒酵母 (R)-1-N-Boc-2-甲基哌内核心抗体
附着孢小隔指孢 3-溴-5-苯甲腺来源的血管内皮生长因子
绿菇 2,4-二-6-苯基-1,3,5-三内皮
双孢蘑菇 2-氟-3-羟基吡啶内皮1
假单胞 2,2'-二烯基双酚A内皮2
嗜中温寒冷杆 5-乙氧基-3-甲内皮特异性分子
焦曲霉 3-[(N-Boc-N-甲氨基)甲基]内皮型一氧化氮合
绿色木霉 2-(N-Cbz)-3-(N-Boc)-2,3-二氨基酸内皮抑
枯草芽孢杆枯草亚种 2--1,3-二甲氧基苯内皮脂肪
Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum 氟锆酸铵内消旋肌单核苷酸脱氢
枯草芽孢杆枯草亚种 7-硝基喹唑啉-2,内源性
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