原代T淋巴细胞培养体系 返回列表页

产品属于：

产品名称：原代T淋巴细胞培养体系    

产品规格：100ml/500ml

货号：FS-01X9971

保存温度（℃）：2-8℃/-20℃

运输温度（℃）：2-8℃/-20℃   

细胞培养的优点：

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

注意事项：

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

 Signal Recognition Particle 9kDa (SRP9)9kDa信号识别颗粒(SRP9)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Granulocyte Specific Anti-Nuclear Antibody (GSANA)粒细胞特异性抗核抗体(GSANA)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Thyroid Hormone Autoantibody (THAA)甲状腺自身抗体(THAA)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Cyclin Dependent Kinase 5 (CDK5)周期依赖性激5(CDK5)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Prostaglandin Endoperoxide Synthase 2 (PTGS2)环加氧2(PTGS2)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Dickkopf Related Protein 1 (DKK1)Dickkopf相关蛋白1(DKK1)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Hydroxylysine (Hyl)羟赖(Hyl)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Metallothionein 3 (MT3)金属硫蛋白3(MT3)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Membrane Protein, Palmitoylated 5 (MPP5)棕榈酰化膜蛋白5(MPP5)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Endomorphin 2 (EM2)内2(EM2)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Mucin 5 Subtype AC (MUC5AC)粘蛋白5AC(MUC5AC)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 8-Hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG)8-羟基脱氧鸟(8-OHdG)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Phospholipase A2, Cytosolic (cPLA2)胞浆型磷脂A2(cPLA2)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Melatonin (MT)褪黑(MT)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Cross Linked C-Telopeptide Of Type I Collagen (CTXI)Ⅰ型胶原交联羧基端(CTXⅠ)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Glucokinase (GCK)葡萄糖激(GCK)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Homing Associated Cell Adhesion Molecule (HCAM)归巢关联细胞黏附分子(HCAM)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Amyloid Beta Peptide 1-42 (Ab1-42)淀粉样蛋白β1-42(Aβ1-42)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T
原代T淋巴细胞培养体系TRPM3  瞬时受体电位离子通道蛋白3抗体（M亚家族）规格: 0.2ml

TRPM5  瞬时受体电位离子通道蛋白5抗体（M亚家族）规格: 0.2ml

TRPM6  瞬时受体电位离子通道蛋白6抗体（M亚家族）规格: 0.2ml

TRPM1  瞬时受体电位离子通道蛋白1抗体（M亚家族）规格: 0.2ml

TRPM4  瞬时受体电位离子通道蛋白4抗体（M亚家族）规格: 0.2ml

DIS3L  有丝分裂控制样蛋白DIS3L抗体规格: 0.2ml

DIS3L2  有丝分裂控制蛋白样DIS3L2抗体规格: 0.2ml

DOM3Z  DOM3Z蛋白抗体规格: 0.2ml