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货号 | FS-X10977 |
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中文名称:β-联蛋白激动剂(WAY-262611)
英文名称:WAY-262611
产品规格:1mL(10mM)|10mg|50mg
货号:FS-X10977
产品介绍:
WAY-262611是无翼的β-联蛋白激动剂,可增加骨形成速率,在TCF-荧光素酶测定实验中的EC50值为0.63μM。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! 号:1123231-07-1 纯度:99.08% 分子量:318.42 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
培养操作步骤:
1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
海岸拟诺卡氏菌全血基因组DNA提取试剂盒Escherichia coli小鼠神经肽Y(NP-Y)
锈色浅野氏菌酵母基因组提取试剂盒Escherichia coli小鼠生长激释放多肽(GHRP)
大肠埃希氏杆菌质粒小量提取试剂盒Escherichia coli小鼠生长激释放多肽(GHRP)
运动节杆菌凝胶回收试剂盒Escherichia coli小鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)
焦曲霉DNA产物纯化试剂盒Escherichia coli小鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)
球孢白僵菌植物基因组提取试剂盒Escherichia coli小鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)
巴基斯坦赖芽孢杆菌细菌基因组提取试剂盒Escherichia coli小鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)
威克克鲁维酵母动物/组织基因组提取试剂盒Escherichia coli小鼠血栓前体蛋白(TpP)
胶孢T4 DNA连接Escherichia coli小鼠血栓前体蛋白(TpP)
Pragia sp.T4 DNA连接Escherichia coli小鼠促性腺激释放激(GnRH)
坟墓节杆菌T4 DNA 激Escherichia coli小鼠促性腺激释放激(GnRH)
黄色短杆菌T4 DNA 激Escherichia coli小鼠抑制B(INH-B)
解淀粉芽孢杆菌重组Taq DNA 聚合Escherichia coli小鼠抑制B(INH-B)
孟氏假单胞菌重组Taq DNA 聚合Escherichia coli小鼠促甲状腺释放激(TRH)
酿酒酵母重组Taq DNA 聚合Escherichia coli小鼠促甲状腺释放激(TRH)
长枝木霉重组Taq DNA 聚合Escherichia coli小鼠促肾上皮质激释放激(CRH)
2型神经纤维瘤抗体须壳孢新生牛眼Tenon's囊成纤维细胞
NFkB诱导激抗体茶叶叶点霉人APP-PS1(C4Y)双基因转染细胞株
细胞核因子/k基因结合核因子抗体露湿粘座孢霉(或露湿漆斑菌)人APP基因转染CHO细胞株
低分子量神经丝蛋白抗体爪哇毛霉C3H/An小鼠结缔组织细胞(L929-TK-)
β-联蛋白激动剂(WAY-262611)稀疏链霉 Heveaflavone精代琥珀裂解
植物乳杆 Torachrysone精
非洲马瘟病(VII型) 丹芝A8-羟基脱氧鸟
传染性支气管炎病 Rubranol氨基合成
短双歧杆 长春质碱肌合成
球孢白僵 Fustin氨基合成
串泡两型毛霉原变种 茵陈色原酮肌合成
螺旋聚孢霉 SinapaldehydeAMP激活蛋白激α
硝盐还原 灯盏花组织蛋白D
巴氏醋杆 Humulene epoxide II苹果脱氢
葡枝根霉 乙酰紫草线粒体呼吸链复合物I
根霉 Salvisyrianone雌酮
假单胞属 灵芝A雄烯二酮
诺卡氏 Piperolactam C雌三
新疆盐地杆 灵芝酮A钠;离子转运ATPβ1肽
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