小鼠肾脏内髓集合管3上皮细胞 返回列表页

产品属于：

产品名称：小鼠肾脏内髓集合管3上皮细胞    

产品英文：IMCD3

货号：FS-01X9640

细胞培养条件：DMEM/F12+10%FBS+1%P/S

生长状态：贴壁生长

产品规格：1×106

单位：T25/瓶

是否提供细胞STR鉴定：不提供STR鉴定报告

保存培养温度（℃）37

运输温度（℃）：常温   

细胞培养的优点：

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

注意事项：

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

人低氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISA试剂盒Human hypoxia-inducible factor 1α，HIF-1α ELISA Kit

人转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA试剂盒Human transferrin receptor，TFR ELISA Kit

人P53(P53)ELISA试剂盒Human p53/tumor protein， p53/TP53 ELISA Kit

人内皮抑素(ES)ELISA试剂盒Human Endostatin，ES ELISA Kit

人铁蛋白(FE)ELISA试剂盒Human ferritin，FE ELISA Kit

人基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒Human tissue inhibitor of metal protease 1，TIMP-1 ELISA Kit

人髓鞘碱性蛋白抗体(MBP)ELISA试剂盒Human myelin basic protein autoantibody，MBP ELISA Kit

人组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒Human Tissue Polypeptide Antigen，TPA ELISA Kit

人肺癌标志物ELISA试剂盒human lung cancer Marker ELISA Kit

人胃癌标志物ELISA试剂盒human gastric carcinoma Marker ELISA Kit

人胰腺癌标志物CA242ELISA试剂盒Human Pancreatic carcinoma markers-CA242 ELISA Kit

人胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒Human Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit

人乳腺癌标志物-CA153ELISA试剂盒Human mammary carcinoma Marker-CA153 ELISA Kit

人卵巢癌标志物CA125ELISA试剂盒Human ovarian cancer marker-CA125 ELISA Kit

人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒Human Alpha-fetoprotein，AFP ELISA Kit

人基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA试剂盒Human tissue inhibitors of metalloproteinase 4，TIMP-4 ELISA Kit

人基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA试剂盒Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3，TIMP-3 ELISA Kit

人基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA试剂盒Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2，TIMP-2 ELISA Kit

人抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒Human Oncostatin-M，OSM ELISA Kit
小鼠肾脏内髓集合管3上皮细胞5-HTR3  5-羟色胺受体3抗体 0.1ml

5-HTR4  5-羟色胺受体4抗体 0.1ml

5 lipoxygenase/ALOX5  5-脂氧合酶抗体 0.1ml

Phospho-5-Lipoxygenase(Ser271)  磷酸化5-脂氧合酶抗体 0.1ml

Phospho-5-Lipoxygenase(Ser663)  磷酸化5-脂氧合酶抗体 0.1ml

ALOX12/12 Lipoxygenase  12脂氧合酶抗体 0.1ml

Penicillin G  素G抗体 0.1ml

8-OHdG  8-羟基脱氧鸟苷抗体 0.1ml