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ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。在实验过程中请严格按照使用说明操作,必能得出准确的实验结果,可提供免费技术咨询服务!
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
接触蛋白1ELISA试剂盒免费包邮 | Contactin 1 | FS-P65409 |
公司“质量是企业是生命之源”,选购优势如下:
1进口抗体——、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3优化方案——回收利用率高、可靠性强
4适用于体液、组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5公司产品仅用于科研可检测指标齐全:生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
核蛋白4抗体(Ran结合蛋白4)产品别名: 2,5-二-4-甲吡啶异珊瑚菜素
免疫球蛋白重链可变区抗体产品别名: 甲膦二乙酯异鼠李素(标准品)
胰岛素样生长因子结合蛋白7抗体产品别名: 5-溴-2-糠甲酯异鼠李素-3-O-槐二糖-7-O-鼠李糖苷(标准品)
胰岛素样生长因子结合蛋白6抗体产品别名: 2-吡啶甲乙酯异鼠李素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(标准品)
KB抑制蛋白激酶ε产品别名: 4-吲哚异鼠李素-3-O-葡萄糖苷(标准品)
整合素β4抗体产品别名: 2,4-二氨苯磺异鼠李素-3-O-新橙皮苷(标准品)
磷化白介素-7受体a抗体产品别名: 3,3,3-三氟异水飞蓟宾
磷化胰岛素受体底物-1抗体产品别名: 2-溴-4'-羟苯乙酮异土木香内酯(标准品)
磷化胰岛素受体底物2抗体产品别名: 1-烯萘异夏佛塔苷(标准品)
磷化KB抑制蛋白激酶β抗体产品别名: 4-氨-2-甲异型南五味子丁素(标准品)
磷化KB抑制蛋白激酶β抗体产品别名: 3--4-氨苯甲异樱花素;异樱花亭(标准品)
磷化KB抑制蛋白激酶β抗体产品别名: 3-硝-1,2,4-三唑异泽兰黄素(标准品)
磷化KB抑制蛋白激酶β抗体产品别名: 双乙酰乙酰对苯二异紫花前胡内酯
磷化KB抑制蛋白激酶β抗体产品别名: 2-叔丁-5-酚益母草(标准品)
磷化整合素连接激酶1抗体产品别名: L-缬氨苄酯盐盐益智(益智仁)(标准品)
接触蛋白1ELISA试剂盒免费包邮Human DQX1 (ATP-dependent RNA helicase DQX1) ELISA KIT木樨草青霉拉丁属名: Penicillium resedanum
Human COA5 (Cytochrome c oxidase assembly factor 5) ELISA KIT果生链核盘菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
Human DAPK3 (Death-associated protein kinase 3) ELISA KIT虫花棒束孢拉丁属名: Isaria farinosa
Human DFNB31 (Whirlin) ELISA KIT大豆慢生根瘤菌用途: 与大豆共生固氮,培养pH4.2生长
Human PGK1(PhosphoglyceRate kinase 1) ELISA Kit白色念珠菌-质控菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
Human DQX1 (ATP-dependent RNA helicase DQX1) ELISA KIT罗氏链霉菌拉丁属名: Streptomyces rochei
Human CYB5D1 (Cytochrome b5 domain-containing protein 1) ELISA KITBacillus anthracis用途: 害虫生物防治
Human DAPK3 (Death-associated protein kinase 3) ELISA KIT枯草芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus subtilis
Human MT-CO2 (Cytochrome c oxidase subunit 2) ELISA KIT短杆菌属拉丁属名: Brevibacterium sp.
Human COA5 (Cytochrome c oxidase assembly factor 5) ELISA KIT球孢白僵菌拉丁属名: Beauveria bassiana
操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准
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