Sam人可溶性粘附分子ELISA试剂盒实验原理 返回列表页

ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有：
①标本因素；
②试剂因素；
③操作因素。在实验过程中请严格按照使用说明操作，必能得出准确的实验结果，可提供免费技术咨询服务！

公司“质量是企业是生命之源”，选购优势如下：
1*抗体——、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的优化方案——回收利用率高、可靠性强
4适用于体液、组织匀浆，细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5可检测指标齐全：生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
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样本实验前准备：
ELISA试剂盒液体样本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
（1）血清
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（2）血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（3）尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
（4）细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。
（5）培养细胞
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（6）组织标本
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
Streptomyces lanatus 羊毛链霉菌Streptomyces lanatus分离基物:土壤冻干安全等级:1模式菌株:，产生防线菌素X复合物ISP-2培养基:：酵母提取物 4.0 g,麦芽提取物 10.0 g,葡萄糖 4.0 g,琼脂 15.0 g,蒸馏 1.0 L,pH7.3。121℃，15分钟灭菌。生长条件:28℃，好氧 纯度：98%

Morchella sp. 羊肚菌属Morchella sp.斜面培养物安全等级:1模式菌株:no研究；。食用。综合PDA：马铃薯煮汁1000mL，磷二氢钾 3g，镁 1.5g，葡萄糖 20g，维生素B1 10mg，琼脂 20g，pH自然。马铃薯煮液：200g马铃薯，去皮，切块，放入蒸馏中煮沸30min，取滤液定容至1000mL,备用。121℃，15min。传代方法①冻干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂轮在冻干管壁划两圈，掰断，用200μL无菌或培养基:充分溶解，平板涂布，活化培养。 ②斜面：试管口用75%酒精擦拭后，火焰灼烧，后用无菌接种铲切块，挑取接入平板或斜面，培养。生长条件:25℃，好氧。生长特性8天长满斜面，菌丝灰白色、稀疏。存储条件:液氮超低温冻结法；定期移植法 纯度：98%

Cordyceps│militaris 蛹虫草(北冬虫夏草，北虫草)Cordyceps│militaris斜面培养物安全等级:1模式菌株:no、药用，适合液体发酵菌丝体。CM0017生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法；定期移植法 纯度：97%

Cordyceps militaris 蛹虫草（北冬虫夏草，北虫草）（斜面）Cordyceps militaris斜面培养物/冻干物安全等级:1模式菌株:no研究；。、药用，适合液体发酵菌丝体。综合PDA琼脂：马铃薯提取液 1.0L，葡萄糖 20.0g，KH2PO4 3.0g，MgSO4.7H2O 1.5g，维生素B1 微量，琼脂 15.0g，pH6.0。生长条件:25℃，好氧生长特性15天长满斜面，菌丝洁白、浓密、丰厚、菌丝绒毛状。液体深层发酵温度23-25℃，pH值为5.5-7，发酵周期3-5天。存储条件:2-8℃，定期移植法，液氮超低温冻结法； 纯度：97%

Campylobacr coli 结肠弯曲菌Campylobacr coli分离基物:狨猴的粪便冻干物安全等级:2模式菌株:no《GB4789.28培养基:和试剂的质量要求》标准菌株。质控菌株，肠道和新兴传染病研究。1、哥伦比亚血平板 2、TSA＋5%脱纤维羊血生长条件:37℃，微需氧存储条件:真空冷冻干燥法 纯度：96%

Rhizobium arachis 花生根瘤菌Rhizobium arachis安全等级:1模式菌株:no根瘤菌培养基:：Yeast eztract （酵母膏） 1g Soil eztract （土壤浸提液） 200ml Mannitol （甘露醇） 10g Agar （琼脂） 15g Distilled war （蒸馏） 800ml pH 7.2[No]：Soil extract：Suspend 50g finely and dried gardon soil in 200ml of tap war. Autoclave at 121℃ for 1 hr. Decant through cotton-cloth, filler though paper, make up volume to 200ml. Resrilize for 20 minus at 121℃ , then mixed with othringredients and distribud. (土壤浸提液的制法：取土壤50克，加200毫升，15磅蒸煮1时，经滤纸过滤后加补足到200毫升。)生长条件:25-28℃，好氧，48h 纯度：96%

Actinomyces oris = Actinomyces viscosus 粘性放线菌Actinomyces oris = Actinomyces viscosus分离基物:人类痰冻干安全等级:1模式菌株:no哥伦比亚血平板，建议购买即用型平板。生长条件:37℃，5%CO2，镜检为阳性杆菌，纯.24h 纯度：96%

Azotobacr vinelandii 棕色固氮菌Azotobacr vinelandii冻干安全等级:1模式菌株:no胰胨大豆琼脂（TSA）：胰蛋白胨(酪蛋白胰酶消化物) 15.0g，大豆蛋白胨(大豆木瓜蛋白酶消化物) 5.0g， 5.0g，琼脂 15.0g，pH7.3±0.2。121℃，15min。生长条件:30℃，好氧 纯度：98%
Sam人可溶性粘附分子ELISA试剂盒实验原理孟加拉红（虎红）培养基人脐动脉平滑肌外周血白ABL1(v-abl Abelson murine leukemia viral oncogene homolog 1)  ABL1抗原

KF链球菌琼脂大鼠垂体胰岛βFUCA1/Alpha L fucosidase I peptide  α-L岩藻糖苷酶抗原

KF链球菌琼脂大鼠脑膜胰腺星状Rabbit IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647标记兔IgG(流式同型对照)

BCYE琼脂基础大鼠脑脊神经元胰腺导管上皮Bassoon(BSN)  

GVPC琼脂基础大鼠皮质神经元颌下腺上皮Bax peptide  Bax（多肽抗原）

GVPC添加物大鼠颗粒腮腺Leptin peptide/FITC  荧光素FITC标记瘦素抗原

胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）大鼠海马神经元视网膜微血管内皮Bcl-2(抗原)  Bcl-2（多肽抗原）

改良平板计数琼脂（MPCA）大鼠黑质神经元梁网BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor)  脑源神经营养因子(脑衍化神经营养因子)（多肽片断抗原）
操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准