人神经母细胞瘤细胞；SK-N-BE（2）说明书 返回列表页

人神经母细胞瘤细胞；SK-N-BE(2)说明书美国菌种保藏中心， 又称美国模式菌种收集中心(ATCC)，是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的，非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年，是世界上大的生物资源中心，由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理，是一家性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品，推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品：细胞株（3000多种）；菌株（15000多种）；动植物病毒株（2500多种）以及重组物质等。
细胞名称  人神经母细胞瘤细胞；SK-N-BE(2)说明书
形态特性  神经母细胞 　
生长特性  　贴壁生长
特征特性   1972年11月从一们多次化疗及放疗的扩散性神经母细胞瘤患儿骨髓穿刺物中建立了SK-N-BE(2)神经母细胞瘤细胞株。 该细胞显示中等水平的多巴胺-β-羟基酶活性。 有报道称SK-N-BE(2)细胞的饱和浓度超过1x106细胞/平方厘米。细胞形态多样，有的有长突触，有的呈上皮细胞样。 细胞会聚集，形成团块并浮起。
培养条件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 优质胎牛血清，10%　
传代方法   消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况  P(36+5)
冻存条件  *培养基+8%DMSO　
支原体检测  　阴性
STR   Amelogenin:X,Y；CSF1PO:10；D13S317:11；D16S539:9,11；D18S51:14,16；D19S433:12,13；D21S11:30,31,32.2；D2S1338:17,23；D3S1358:19；D5S818:12；D7S820:9,10；D8S1179:13,14；FGA:22,25；TH01:6,7；TPOX:8,11；vWA:18
同工酶

染色体

使用权限 A类
人神经母细胞瘤细胞；SK-N-BE(2)说明书操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
人神经母细胞瘤细胞；SK-N-BE(2)说明书注意事项：
1. 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
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小鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human phospholipase C gamma chain (PLC 1) ELISA Kit 人磷酯酶Cγ链(PLCγ1)ELISA试剂盒

HumanNa+/H+exchanger3,NHE3ELISAKit 人Na+/H+交换体3(NHE3)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenIerleukin2,IL-2ELISA试剂盒鸡白介素2(IL-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞HISTONEH3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

Mouseglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit小鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠红细胞生成素受体(EPOR)ELISA试剂盒 ，英文名： EPOR ELISA Kit

大鼠补体片断5a(C5a)ELISA检测试剂盒RatComplemefragme5a,C5aELISAKit 96T/48T

人补体1抑制物抗体-IgG(C1INH-IgG)免疫试剂盒 Human Compleme 1 inhibitor aoaibody-IgG,C1INH-IgG ELISA Kit

Ratansforminggrowthfactorsβ2,TGFβ2ELISAKit大鼠转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

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PorcineEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISA试剂盒猪内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

猪肺表面活性物质相关蛋白B(SP-B)免疫试剂盒 Pig Pulmonary surfacta-associated protein B,SP-B ELISA Kit

HumanIerleukin15,IL-15ELISAKIT 人白介素15(IL-15)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanneuropeptideY,NP-YELISA试剂盒人神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒规格：96T/48T

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CM-R080大鼠大隐静脉内皮细胞*培养基100mL

C3H/An小鼠结缔组织细胞(L929-TK-);LTK- 小鼠肠平滑肌细胞*培养基 100mL

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FOLR1 Others Mouse 小鼠 FOLR1 / FR-alpha 人细胞裂解液 (阳性对照)
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人神经母细胞瘤细胞；SK-N-BE(2)说明书ABHD4 Others Human 人 ABHD4 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

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人肺间充质干细胞RNAHPMSC miRNA5 μg

A673细胞，横纹肌瘤细胞 人非小细胞肺癌细胞,NCI-H838细胞 CL-0460U14-GFP(小鼠子细胞)5×106cells/瓶×2

中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1

FGFR2 Others Human 人 FGFR2 人细胞裂解液 (阳性对照)