人神经母细胞瘤；SH-SY5Y说明书 返回列表页

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细胞名称  人神经母细胞瘤；SH-SY5Y说明书
形态特性  上皮样细胞 　
生长特性  　贴壁悬浮混合生长
特征特性   该细胞系来源于1970年建立的一神经母细胞瘤患者的转移骨瘤灶细胞SK-N-SH经三次克隆后的亚系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。 该细胞显示中等水平的多巴胺-β-羟基酶活性。 SH-SY5Y细胞的生长密度可高达1X106细胞/cm2，生长成悬浮和贴壁混合生长，有的聚集成细胞丛
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS　
传代方法   1:3传代；3-4天一次
传代情况  PN8
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS　
支原体检测  　荧光法（-）
STR   Amelogenin：X；CSF1PO:11；D13S317:11；D16S539:8,13；D18S51:13,16；D19S433:13,14；D21S11:31,31.2；D2S1338:17,19；D3S1358:15,16；D5S818:7,12；D7S820:7,10；D8S1179:10,15；FGA:23.2,24；TH01:7,10；THOX:8,11；vWA:14,18；
同工酶 无

染色体 46-48

使用权限 A类
人神经母细胞瘤；SH-SY5Y说明书操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
人神经母细胞瘤；SH-SY5Y说明书注意事项：
1. 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
人神经母细胞瘤；SH-SY5Y说明书美国菌种保藏中心， 又称美国模式菌种收集中心(ATCC)，是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的，非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年，是世界上大的生物资源中心，由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理，是一家性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品，推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品：细胞株（3000多种）；菌株（15000多种）；动植物病毒株（2500多种）以及重组物质等。
小鼠胃泌酸调节素(OXM)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human phosphoenolpyruvate carboxykinase (PCK) ELISA Kit 人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)ELISA试剂盒

Humanalkalinephosphatase,ALPELISAKit 人碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenIerleukin1,IL-1ELISA试剂盒鸡白介素1(IL-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞ERK蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

MouseGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠横纹肌辅肌动蛋白α(sm Actinin-α)ELISA试剂盒 ，英文名： sm Actinin-α ELISA Kit

大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA检测试剂盒RatdipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣELISAKit 96T/48T

人玻连蛋白(VTN)免疫试剂盒 Human vionectin ELISA Kit

Ratiglyceride,TGELISAKit大鼠甘油三酯(TG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

MGMT基因甲基化程度定量分析试剂盒20次

Porcineepidemicdiarrheavirusaibody,PEDVELISA试剂盒猪流行性腹泻病毒抗体(PEDV)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人胃癌标志物ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

猪多肽YY(PYY)免疫试剂盒 Pig Peptide YY,PYY ELISA kit

Chicken17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISAKit 鸡17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanneuophilelastase,NEELISA试剂盒人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒规格：96T/48T

ELISAKitMHCⅢ/SLAⅢ猪主要组织相容性复合体Ⅲ类规格：48T/96T

HumanFibrinogenDegradationProduct，FDPELISAKit人血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人癌细胞;MDA-MB-231

KLK3 Others Human 人 KLK3 / PSA / Kallikrein-3 人细胞裂解液 (阳性对照)

MT-4 人急性淋巴母细胞白血病细胞

A-673 人横纹肌瘤细胞 A-673 rhabdomyoma cells DMEM培养基+10%FBS

TDGF1 Protein Human 重组人 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 标签)

人脐静脉内皮细胞;HUV-EC 人胰腺星状细胞*培养基 100mL
人癌细胞;MDA-MB-231

KLK3 Others Human 人 KLK3 / PSA / Kallikrein-3 人细胞裂解液 (阳性对照)

MT-4 人急性淋巴母细胞白血病细胞

A-673 人横纹肌瘤细胞 A-673 rhabdomyoma cells DMEM培养基+10%FBS

TDGF1 Protein Human 重组人 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 标签)

人脐静脉内皮细胞;HUV-EC 人胰腺星状细胞*培养基 100mL
人神经母细胞瘤；SH-SY5Y说明书GUCA1A Others Human 人 GCAP1 / GUCA1A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

牛肾细胞;MDBK

肾系膜细胞Many types of cells包装：5 ×105次方(1ml)

团头鲂尾鳍细胞;WCF 人卵巢畸胎瘤细胞，PA-1细胞 SK-OV-3(卵巢癌细胞)

人皮肤黑色素瘤细胞;SK-MEL-1

EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 / EFL2 人细胞裂解液 (阳性对照)