CR2/sCD21人可溶性CD2ELISA试剂盒实验原理 返回列表页

ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有：
①标本因素；
②试剂因素；
③操作因素。在实验过程中请严格按照使用说明操作，必能得出准确的实验结果，可提供免费技术咨询服务！

公司“质量是企业是生命之源”，选购优势如下：
1*抗体——、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的优化方案——回收利用率高、可靠性强
4适用于体液、组织匀浆，细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5可检测指标齐全：生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
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样本实验前准备：
ELISA试剂盒液体样本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
（1）血清
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（2）血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（3）尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
（4）细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。
（5）培养细胞
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（6）组织标本
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
Eupenicillium│parvum 微细正青霉Eupenicillium│parvum分离基物:土壤冻干物安全等级:1CM0072生长条件:25℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度：98%

Talaromyces│ruber 红色篮状菌Talaromyces│ruber分离基物:植物块根冻干物安全等级:1分类学研究。CM0077生长条件:25℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：98%

Eupenicillium│ochrosalmoneum 赭鲑色正青霉Eupenicillium│ochrosalmoneum分离基物:玉米冻干物安全等级:1CM0072生长条件:25℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度：98%

Salmonella│enrica subsp. enrica 肠沙门氏菌肠亚种Salmonella│enrica subsp. enrica冻干物安全等级:2模式菌株:no研究、质量控制CM0002生长条件:36℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度：98%

Morganella morganii 摩氏摩根氏菌Morganella morganii冻干物安全等级:1模式菌株:no研究、质量控制营养肉汁琼脂：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，琼脂 15.0g，蒸馏 1.0L，pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O，则有利于产生芽孢。生长条件:37℃，好氧，24h。存储条件:真空冷冻干燥法 纯度：98%

Salmonella│enrica subsp. enrica serotype Wandsworth 肠沙门氏菌肠亚种旺兹沃思血清型Salmonella│enrica subsp. enrica serotype Wandsworth冻干物安全等级:2模式菌株:no研究、质量控制CM0002生长条件:36℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度：99%

Tuberibacillus│calidus 热生肿块芽孢杆菌Tuberibacillus│calidus分离基物:堆肥冻干物安全等级:1CM0998生长条件:50℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：99%

Bifidobacrium│bifidum 两歧双歧杆菌Bifidobacrium│bifidum分离基物:成年人肠道冻干物安全等级:1模式菌株:no用于益生菌类食品。CM0791生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：97%
CR2/sCD21人可溶性CD2ELISA试剂盒实验原理叶测定培养基人肺成纤维肝内胆管上皮ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Arg22)  海葵神经素（35肽）

泛测定培养基人支气管平滑肌胃黏膜上皮ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Dap22)  海葵神经素（35肽）

游离生物素测定培养基人气管平滑肌肾实质ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln9)  海葵神经素（35肽）

肌测定培养基人支气管成纤维肾系膜ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln11)  海葵神经素（35肽）

多价蛋白胨酵母膏（PY）培养基人骨骼肌膀胱上皮rHBcAg  重组乙肝病核心抗原

营养肉汤（不含糖）人骨骼肌卫星膀胱平滑肌rHBeAg(Hepatitis B Virus E Antigen protein)  重组乙肝病e抗原

亮绿乳糖培养基（BGL）人骨骼肌成肌肾动脉内皮rDen(rh-Dengue Virus)  多价重组人登革热病诊断抗原

肠道菌增菌肉汤(EE)人肾上腺皮质肾动脉平滑肌rDen-2(rh-Dengue Virus)  重组人登革热病2型诊断抗原
操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准