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| 货号 | FS-01S63838 |
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产品名称：HP亚铁氧化酶检测试剂盒可见分光光度法
规格：50管/48样
检测方法：可见分光光度法
货号：FS-01S63838
商品介绍：
测定意义 Hephaestin (HP)作为铜蓝蛋白的同系物,是近年来发现的铁转运蛋白亚铁氧化酶，HP属亚铁氧化酶家族成员,具有亚铁氧化酶的活性,参与体内铁代谢。HP的表达可受铁、铜及锌等金属离子的调节。HP催化Fe2+氧化生成Fe3+，在介导铁的跨膜转运中有重要作用。 测定原理： HP催化Fe2+氧化为Fe3+，Fe2+和ferrozine反应显色，在560 nm下有特征吸光值。通过测定Fe2+的减少速率可测得亚铁氧化酶的活性。 自备用品： 可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 200μL×1 支，4℃保存；
试剂三：液体 4mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×2 瓶，4℃保存。
粗酶液提取：
1、细胞或组织样品的制备： 培养细胞：先收集细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml提取液），超声波破碎细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 2、血清（浆）样品：直接检测。 |
操作步骤:
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。 7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。 |
CTBP2 C末端结合蛋白2抗体 * 0.1ml
PTGER1 前列腺EP1受体抗体 * 0.1ml
phospho-PLB/phospholamban(phospho Ser16+Thr17) 磷化心脏磷蛋白抗体 * 0.1ml
ASM/Acid sphingomyelinase 性神经鞘磷脂抗体 * 0.1ml
IL-1 Beta/IL-1B 白介1β抗体 * 0.1ml
BFAR/RNF47 环指蛋白47抗体 * 0.2ml
WISP1 Wnt1信号通路蛋白1抗体 * 0.2ml
Annexin A8 膜粘连蛋白8抗体 * 0.1ml
CD105/Endoglin CD105抗体 * 0.1ml
GLUT10/Glucose Transporter GLUT10 葡萄糖转运蛋白10抗体 * 0.2ml
CD54/ICAM-1 细胞间粘附分子1抗体 * 0.1ml
Filaggrin 兜甲蛋白抗体 * 0.2ml
Sortilin/NTR3/Gp95 神经降压受体3抗体（糖蛋白95） * 0.2ml
IFNA16/Interferon alpha 16 干扰α16抗体 * 0.2ml
NET1 去甲转运蛋白/神经递质去甲转运体抗体 * 0.2ml
HP亚铁氧化酶检测试剂盒可见分光光度法脂肪去饱和1Anti-GPR68 Antibody大鼠c-myc癌基因产物（c-myc）elisa定量检测试剂盒
γ1基丁偶联血蓝蛋白Anti-GPR50 Antibody大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL/TNFSF10）elisa定量检测试剂盒
γ1基丁偶联牛血清白蛋白Anti-GPR85 Antibody大鼠高敏甲状腺（U-T4）elisa定量检测试剂盒
糖原合激-3 beta（多肽）Anti-GPR75 Antibody大鼠I型前胶原基端原肽（PINP）elisa定量检测试剂盒
荧光标记庆大霉Anti-GPR87 Antibody大鼠促甲状腺胚胎因子（TEF）elisa定量检测试剂盒
糖原合激-3α （多肽）Anti-GPR82 Antibody大鼠血小板膜糖蛋白IV （GP4/CD36）elisa定量检测试剂盒
磷化糖原合激-3β （多肽）Anti-GPR87 Antibody大鼠周期A1（CCNA1） elisa定量检测试剂盒
磷化糖原合激3α/β抗原Anti-GPRC5A Antibody大鼠信号传导转录激活因子3（STAT3）elisa定量检测试剂盒
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