13524666654
当前位置：上海抚生实业有限公司>>细胞生物学试剂>>细胞组织染色>> 内质网红色荧光探针(ER-Tracker Red)
| 货号 | FS-X9802 |
|---|
中文名称：内质网红色荧光探针(ER-Tracker Red)
英文名称：
产品规格：20μL
货号：FS-X9802
产品介绍:
ER-Red 染料是细胞渗透性的活细胞染料，对内质网(ER) 有高度选择性；如用手册提供的方法进行染色，染色图案在固定后部分保留。该染料含绿色荧光BODIPY:emoji: TR 染料。（优降糖）能结合到内质网上突出的ATP-敏感K+ 通道的磺脲类受体上；药理学活性可能影响内质网功能。某些特化细胞中磺脲类受体的可变表达可能导致非内质网标记。 浓度：1mM in DMSO 分子式：C44H42BClF2N6O7S2 分子量：915.2316 建议工作浓度：1μM 储存：-20℃，避光，有效期6个月。 |
培养操作步骤：
1．公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
腭/肺/鼻上皮癌关联蛋白(PLUNC)英文名：PLUNC 19号染色体开放阅读框80抗体包装100g
多效生长因子(PTN)英文名：PTN 半胱双加氧1抗体包装25g
多配体蛋白聚糖1(SDC1)英文名：SDC1 胶原蛋白11A2抗体包装5g
多聚免疫球蛋白受体(PIGR)英文名：PIGR CUL4B蛋白抗体包装1g
多聚蛋白2(MMRN2)英文名：MMRN2 1号染色体开放阅读框103抗体包装5g
多功能肽2(LMP2)英文名：LMP2 凋亡抑制因子2抗体包装25g
多功能蛋白聚糖(VS)英文名：VS 促肾上腺皮质激释放激结合蛋白抗体包装5g
多巴胺转运蛋白(DAT)英文名：DAT 3号染色体开放阅读框23抗体包装1g
多巴胺受体D4(DRD4)英文名：DRD4 瓜环肽抗体包装25g
多巴胺受体D3(DRD3)英文名：DRD3 分裂核仁蛋白1抗体包装5g
多巴胺受体D1(DRD1)英文名：DRD1 钙/钙调蛋白依赖性蛋白激4抗体包装1g
多胺氧化(PAOX)英文名：PAOX 磷化钙/钙调蛋白依赖性蛋白激4抗体包装25g
对氧磷2(PON2)英文名：PON2 胶原蛋白4a2亚基抗体包装5g
对氧磷1(PON1)英文名：PON1 CD161c抗体包装100g
端粒关联蛋白1(TEP1)英文名：TEP1 补体C1r链多肽抗体包装25g
根瘤菌(紫云英)Mesorhizobium│sp. 质量规格：HPLC>98%,标准品孕激/孕试剂盒野马追内酯A;Eupalinolide
: ivcas7.01221资源名称: 蕈状芽胞杆菌 质量规格：>97%,进分sigma货号A3656 钥孔虫戚血蓝蛋白试剂盒乙氧基白屈菜红碱; 5-Ethoxych
: 65092442资源名称: 羊布氏菌 质量规格：>99%,BR钥孔虫戚血蓝蛋白试剂盒异夏佛塔;Isoschaftoside
内质网红色荧光探针(ER-Tracker Red)水单胞 4-哌酪抗体
链格孢 2-氧化-6-甲甲酯酪
枯草芽孢杆 2-[[叔丁氧羰基]甲基氨基]发热伴血小板减少综合征
香蕉 磺酰磺视神经蛋白
密苏里游动放线 磺磺隆p62
大肠埃希氏 S-3-BOC-氨甲基吡咯烷S100钙结合蛋白A8
类干酪乳杆 N,N-二甲基-4-((E)-4-((E)-(4-硝基亚苄基)氨基)苯乙烯基)苯普列克底物蛋白
管毛壳 2-Boc-六氢吡咯并[3,4-c]吡咯前纤维蛋白1抗体
链霉属 3,5-二溴-4-羟基吡啶14-3-3家族z蛋白
淡紫紫霉 alpha-溴-2-可替宁
黄色直丝链霉 4-氟-3-甲氧基溴苄甘胆
黑木耳 4-噻吩[2,3-D]嘧啶阿法骨化
假单胞 噻吩并[2,3-D]嘧啶-4(3H)-酮磷化p38丝裂原活化蛋白激
短小芽孢杆 羟乙磺喷他眯缩宫
秦氏蜜环 4-甲硫基乙酯曼氏裂头蚴IgG抗体
请输入账号
请输入密码
请输验证码
以上信息由企业自行提供，信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责，仪表网对此不承担任何保证责任。
温馨提示：为规避购买风险，建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。
仪表网