Medium M3基础培养基 返回列表页

产品属于：

产品名称：Medium M3基础培养基    

英文名称：Medium M3

货号：FS-02X0006

产品规格：500ml   
细胞培养的优点：

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

注意事项：

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

 Complement 1 Inhibitor (C1INH)补体1抑制因子(C1INH)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Prostaglandin F Receptor (FP)前列腺F受体(FP)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Prostaglandin E Receptor 2 (EP2)前列腺E受体2(EP2)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Apolipoprotein C1 (APOC1)载脂蛋白C1(APOC1)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Maltase Glucoamylase, Intestinal (MGA)麦芽糖糖化(MGA)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Procollagen II C-Terminal Propeptide (PIICP)Ⅱ型前胶原羧基端原(PⅡCP)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Annexin A5 (ANXA5)膜联蛋白A5(ANXA5)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Beta-2-Microglobulin (b2M)β2-微球蛋白(β2M)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Transferrin Receptor 2 (TFR2)转铁蛋白受体2(TFR2)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Centromere Protein H (CENPH)着丝粒蛋白H(CENPH)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Linker For Activation Of T-Cell (LAT)T-细胞激活连接蛋白(LAT)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Anti-SSB/La Antibody (Anti-La)抗SSB/La抗体(Anti-La)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Centromere Protein E (CENPE)着丝粒蛋白E(CENPE)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Connexin 43 (CX43)间隙连接蛋白43(CX43)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Talin (TLN)踝蛋白(TLN)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Calnexin (CNX)钙联蛋白(CNX)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 B-Cell Activation Factor Receptor (BAFFR)B-细胞激活因子受体(BAFFR)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T

 Histone H2A (H2A)组蛋白H2A(H2A)检测试剂盒(联免疫吸附试验法)规格：48T/96T
Medium M3基础培养基MARCH4  膜相关环指蛋白4抗体规格: 0.2ml

MARCH5  膜相关环指蛋白5抗体规格: 0.2ml

MARCH6  膜相关环指蛋白6抗体规格: 0.2ml

MARCH7/Axotrophin  膜相关环指蛋白7抗体规格: 0.2ml

MARCH8  膜相关环指蛋白8抗体规格: 0.2ml

MARCH9  膜相关环指蛋白9抗体规格: 0.2ml

MARCH10  膜相关环指蛋白10抗体规格: 0.2ml

MARCH11  膜相关环指蛋白11抗体规格: 0.2ml