当前位置:上海抚生实业有限公司>>ELISA试剂盒实验原理>>人ELISA试剂盒实验原理>> 48T/96TMP-Ab人肺炎支原体抗体ELISA试剂盒实验原理
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。在实验过程中请严格按照使用说明操作,必能得出准确的实验结果,可提供免费技术咨询服务!
产品名称 | MP-Ab人肺炎支原体抗体ELISA试剂盒实验原理 |
英文名称 | Human Mycoplasma pneumoniae antibody, MP-Ab Elisa Kit |
货号 | FS-H63406 |
公司“质量是企业是生命之源”,选购优势如下:
1*抗体——、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的优化方案——回收利用率高、可靠性强
4适用于体液、组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5可检测指标齐全:生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
Verticillium│dahliae Kleb. 大丽轮枝霉Verticillium│dahliae Kleb.分离基物:根系斜面培养物安全等级:1模式菌株:no14生长条件:25-27存储条件:定期移植法 纯度:97%
Xylaria│aemulans Starbäck 亚炭角菌Xylaria│aemulans Starbäck分离基物:腐木斜面培养物安全等级:1模式菌株:no14生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度:98%
Alrnaria macrospora Zimm. 大孢链格孢Alrnaria macrospora Zimm.分离基物:棉花病叶。寄主名称:棉花。致病对象:植物。采集地:湖北荆州斜面培养物安全等级:1模式菌株:no综合PDA:马铃薯煮汁1000mL,磷二氢钾 3g,镁 1.5g,葡萄糖 20g,维生素B1 10mg,琼脂 20g,pH自然。马铃薯煮液:200g马铃薯,去皮,切块,放入蒸馏中煮沸30min,取滤液定容至1000mL,备用。121℃,15min。生长条件:28℃,好氧存储条件:定期移植法 纯度:98%
Alrnaria longipes (Ellis & Everh.) E.W. Mason 长柄链格孢(斜面)Alrnaria longipes (Ellis & Everh.) E.W. Mason分离基物:油松斜面培养物安全等级:1模式菌株:no研究;教学综合PDA:马铃薯煮汁1000mL,磷二氢钾 3g,镁 1.5g,葡萄糖 20g,维生素B1 10mg,琼脂 20g,pH自然。马铃薯煮液:200g马铃薯,去皮,切块,放入蒸馏中煮沸30min,取滤液定容至1000mL,备用。121℃,15min。生长条件:25℃,好氧生长特性在TWA+W培养基:上菌落灰褐色,轮纹状展开,气生菌丝短,产孢量大。分生孢子梗中度黄褐色至褐色,顶端色浅,单生或簇生,屈膝状弯曲,多分支。分生孢子浅至中度黄褐色,椭圆形,一般直,光滑,具3个假隔膜,21.5~28.5 × 7.5~11.5μm;脐部略突出,色暗。存储条件:定期移植法 纯度:99%
Lysurus│mokusin (L.) Fr. 棱柱散尾菌Lysurus│mokusin (L.) Fr.分离基物:子实体斜面培养物模式菌株:no药用14生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度:99%
Bacillus│natto 纳豆芽孢杆菌Bacillus│natto斜面培养物安全等级:1模式菌株:no饲料、食品6生长条件:37存储条件:定期移植法 纯度:99%
Phytophthora│cactorum (Lebert & Cohn) J. Schröt. 恶疫霉Phytophthora│cactorum (Lebert & Cohn) J. Schröt.分离基物:梨果实斜面培养物安全等级:1模式菌株:no14生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度:97%
Coniothyrium│fuscidulum Sacc. 桑壳圆孢菌Coniothyrium│fuscidulum Sacc.分离基物:黄杨叶片斜面培养物安全等级:1模式菌株:no植物病原物;用于该类群菌的系统学研究,尤其是与胶盘孢、粘盘孢、盘长孢、盘多毛孢等的系统学研究14生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度:98%
MP-Ab人肺炎支原体抗体ELISA试剂盒实验原理CCR7/CD197 表面趋化因子受体7抗体7-甲氧基-4'-羟基异黄1,6-二苯基-1,3,5-己三烯Human CP (Ceruloplasmin) ELISA Kit
CXCL10/Gamma-IP-10 CXCL10趋化因子10/干扰素诱导蛋白10抗体二甲磺阿米三1,6-二苯基-1,3,5-己三烯Human α-CTx (Alpha Crosslaps) ELISA Kit
CXCR7/RDC1 表面趋化因子受体7抗体萝巴新2-甲基烟乙酯Human CD42 (Cluster of Differentiation 42) ELISA Kit
CCR-8 表面趋化因子受体8抗体枸橼锌2-甲基烟乙酯Human HLA-B27 (Human Leukocyte Antigen B27) ELISA Kit
CCL25/CCR-9 表面趋化因子受体9抗体卡莫2-甲基烟乙酯Human FGFR2 (Fibroblast Growth Factor Receptor 2) ELISA Kit
CCL28/MEC 粘膜相关上皮趋化因子28抗体奥沙普秦3,5-二甲氧基苯甲酰胺Human IFABP/FABP2 (Intestinal Fatty Acid Binding Protein) ELISA Kit
CCR-10 表面趋化因子受体10抗体尼可占替诺(烟占替诺)3,5-二甲氧基苯甲酰胺Human LP-a (Lipoprotein a) ELISA Kit
CCRK 周期相关激酶抗体盐帕罗西汀2-(2-乙基)二二乙酯Human MBP (Myelin Basic Protein) ELISA Kit
操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准
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